Лекция: Летальные инфекции кошек. Принципы диагностики и профилактики. ПЦР-комплексы для собак. Контроль, профилактика и лечение

Коронавирус широко распространен в популяции домашних кошек, поэтому ветеринарные врачи часто сталкиваются с тремя типами отношения хозяев зараженных коронавирусом зверей к своим питомцам:

2) при наличии симптомов заболевания и при положительных анализах на коронавирус одновременно люди (как правило опытные пользователи Интернета, старожилы кошачьих форумов) говорят «ай, фигня, это же всего-лишь безобидный коронавирус, зачем его лечить и ходить с этим к врачу, не обращайте внимание и оно само пройдёт»

3) лечить, лечить и ещё раз лечить! Многим тяжело принять то, что с некоторыми заболеваниями подавляющее большинство кошек прекрасно справляются самостоятельно. Есть болезнь - значит необходимо ее лечить, и пошло-поехало - уколы, таблетки, пересдача анализов раз в неделю…

Как бы грустно ни было это признавать, но и среди людей, связанных с кошками профессионально - ветеринарных врачей и заводчиков, можно нарваться на радикальные взгляды в сторону коронавируса.
Иногда приходится видеть рекомендации к эвтаназии животного, у которого аж коронавирус (как правило, усыпление пациента мотивировали тем, что коронавирус может мутировать в FIP - вирус инфекционного перитонита кошек),
или слышать от заводчиков «да этот коронавирус есть вообще во всех питомниках, поэтому мы на него не проверяем, попробуйте поищите питомник без коронавируса - не найдёте».

Все описанные выше крайности в отношении к коронавирусу у кошек - ошибочны и основаны на безграмотности в теме заболевания. Владельцы кошек не виноваты в этом, они не обязаны иметь образование ветеринарного врача и знать всё обо всех болезнях.
Но иногда отсутствие адекватной информации под рукой вовремя может привести к самым печальным последствиям - к серьёзному заболеванию или даже к гибели животного.
Коронавирус у кошек - это не приговор, не «страшное, неизлечимое, смертельное», но и не пустяк, о котором можно вообще забыть. Это инфекционная болезнь со своими особенностями течения, о которых необходимо знать, чтобы принимать грамотные действия своевременно и качественно заботиться о своём питомце.

Поэтому сегодня мы решили рассказать Вам о коронавирусе - просто.

ПАТОФИЗИОЛОГИЯ

Вирус проникает в организм через ротоглотку, достигает желудочно-кишечного тракта и вызывает воспалительный процесс слизистой оболочки тонкого отдела кишечника (живёт в клетках кишечного эпителия и разрушает их).
Иммунитет кошки работает над выведением вируса и большинство животных побеждают инфекцию самостоятельно. Процесс естественного выведения коронавируса из организма может занимать от нескольких недель до нескольких месяцев.
Если большое количество кошек живут скученно, то они могут перезаражать коронавирусом друг друга снова и снова.
Небольшой процент кошек могут остаться носителями коронавируса навсегда (13% инфицированных).

ПЕРЕДАЧА ВИРУСА

Коронавирус в большом количестве (миллиарды вирусных частиц на 1 грамм кала) выделяется с фекалиями инфицированных. Заражение происходит, когда кошки глотают или вдыхают вирус.
Заразность коронавируса очень высокая, для распространения достаточно небольшой частицы наполнителя из лотка, которым пользовалась выделяющая вирус кошка.

Кошачий коронавирус хорошо себя чувствует во внешней среде и может оставаться жизнеспособным на поверхностях в течение 7 недель.

По разным исследованиями от 60 до 80% всех кошек планеты заражены коронавирусом или когда-то контактировали с ним.

Риск передачи коронавируса через прикосновения рук, одежду или животных других видов невелик, только если руки/одежда/другое животное будут загрязнены непосредственно калом выделяющего вирус кота.

FIP - ВИРУСНЫЙ ПЕРИТОНИТ КОШЕК

«Кишечный» коронавирус кошек (FCoV), о котором идёт речь в статье, имеет привязанность к эпителиальным клеткам кишечника и может размножаться только в них.

Существует очень похожий вирус FIPV - вирус инфекционного перитонита кошек/ФИП, который не привязан ни к какому органу, с током крови распространяется по всему организму и поражает все системы органов.

Эти два вируса чрезвычайно близки по антигенному составу, и существует вероятность того, что ФИП - это мутационная форма коронавируса. Принято считать, что под воздействием стресс-факторов коронавирус может мутировать в ФИП - это не доказано наверняка, но на сегодняшний день является основной теорией.

Коронавирус обычно протекает достаточно легко и не является заболеванием, угрожающим жизни животного, в то время как ФИП - тяжёлое, 100% смертельное состояние.

Очень важно понимать, что хотя коронавирус и ФИП, вероятно, имеют одного и того же возбудителя, это принципиально разные, ни в коем случае не тождественные заболевания .
Кошка с положительным анализом на коронавирус может никогда не заболеть перитонитом, в то время как у кошки с инфекционным перитонитом может быть отрицательный анализ кала на коронавирус.

ФИП развивается менее чем у 10% кошек, зараженных кишечным коронавирусом.

Если ваше животное погибло из-за инфекционного перитонита, выждите не менее 7 недель прежде чем приносить в этот же дом нового питомца.

ПРОГНОЗ ПРИ КОНТАКТЕ С КОРОНАВИРУСОМ

При контакте кошки с коронавирусом существуют 4 варианта развития событий:

1) У животного разовьется ФИП (как было сказано выше, это происходит менее чем у 10% зараженных).

2) Кошка некоторое время будет выделять коронавирус и вырабатывать антитела к нему, затем прекратит выделять вирус, и титр антител снизится вплоть до нуля. Примерно в половине всех случаев заражения выделение вируса длится в пределах месяца, и только 5% кошек выделяют вирус более 9 месяцев.

3) Кошка становится носителем коронавируса пожизненно (13% всех инфицированных кошек). Такие кошки постоянно выделяют FCoV в фекалиях, оставаясь заразными непрерывно. Большинство пожизненных носителей остаются клинически здоровыми, однако у некоторых проявляется хроническая диарея.

4) Кошка устойчива к вирусу - представляется, что около 4% кошек из всей популяции абсолютно устойчивы к коронавирусной инфекции.

СИМПТОМЫ КОРОНАВИРУСА

Коронавирусная инфекция у кошек чаще всего протекает без каких-либо жалоб, либо проявляется умеренно выраженными симптомами, такими как

Мягкий или жидкий стул,
- плохой аппетит,
- температура.

Как правило, эти симптомы не вызывают серьезного ухудшения общего состояния и не требуют медикаментозного лечения, если речь не идет о присоединении вторичной инфекции или сопутствующих заболеваниях.

Нередко от владельцев домашних животных можно услышать заключения: «А у нас коронавирус протекал тяжело, с некупируемой рвотой, лихорадкой, облысением и ампутацией правой тазовой конечности» (утрированно). Чаще всего это означает, что у пациента был(и) ещё диагноз(ы), который(е) не установили, но успешно списали всё на случайно пришедший в анализах положительный коронавирус.

Очень важно понимать , что если у котёнка жидкий стул и плохой аппетит, а также положительный анализ на коронавирус, то это вовсе не значит, что коронавирус является причиной симптомов болезни, он может просто тоже быть у животного, заодно, в то время как зверь страдает от инородного тела, застрявшего в кишечнике, например (или от любого из ещё 150 дифференциальных (возможных) диагнозов с такими распространёнными симптомами, как сниженный аппетит и диарея).
Именно поэтому, даже если вы знаете, что у питомца коронавирусный энтерит, никогда нельзя списывать на него появившиеся симптомы, при их появлении обязательно необходимо обратиться в ветеринарную клинику для диагностики.

ДИАГНОСТИКА КОРОНАВИРУСА

Коронавирус выделяется со стулом, поэтому наиболее чувствителен тест на определение вируса в фекалиях.

Однократное исследование малоинформативно, так как кошка может выделять вирус время от времени, не выделяя его в течение коротких промежутков времени вообще.
ПЦР-тест должен быть частью серии исследований, лучше всего делать его в сочетании с иммунофлюоресцентными анализами на антитела (в клинике вы чаще всего услышите словосочетание «титр антител», тут всё просто - при заражении и какое-то время после организм выделяет антитела, чтобы победить инфекцию, и антитела не выделяются, если им не с чем бороться).

Существуют разные мнения насчет того, как достоверно установить факт избавления кошки от инфекции - как правило, для этого требуется выполнение 5 последовательных исследований фекалий методом ПЦР с интервалом в 4 недели, и получить все результаты негативными. Согласно шведскому институту вирусологии, кошка считается не выделяющей коронавирус, если будут отрицательными 4 исследования фекалий методом ПЦР, сданные один за одним с промежутком 7–10 дней.

Уменьшение титра антител до уровня <10 по результатам анализа серологическим методом также указывает на выведение вируса из организма, снижение титра антител всегда наблюдается уже после того, как кошка перестала выделять вирус.

Для того, чтобы установить, что кошка является пожизненным носителем коронавируса, результаты анализов кала на FCoV должны оставаться положительными в течение как минимум восьми месяцев.

ПРОФИЛАКТИКА КОРОНАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ

Перед тем как подселять новых животных в группу кошек, свободную от коронавируса, новичков необходимо обследовать и не вводить в прайд серопозитивных животных (серопозитивные - это кошки, у которых организм вырабатывает антитела против коронавируса, вырабатывает - значит знаком с ним, значит может быть инфицированным).

Карантин в отдельном помещении с отдельным лотком должен составлять 12 недель, после чего проводится повторный анализ. Только кошки с нулевым титром антител должны быть допущены в питомники, свободные от коронавируса.

Инфекция FCoV может быть естественным образом выведена из питомника, где обитает менее 10 животных, в то время, как если в одном помещении контактируют более 10 животных, спонтанное естественное выведение вируса очень маловероятно, так как происходит постоянная перекрестная передача возбудителя от одной кошки к другой.
В таких группах кошек необходимо провести тестирование и изолировать кошек с котятами на 12 недель. Ранний отъем (до 4 недель) и удаление котят на 12 недель от серопозитивных матерей способствует искоренению инфекции.
Все кошки, дающие положительную реакцию, должны быть удалены.

Если кошки содержатся в доме, необходимо обеспечить индивидуальный лоток для каждой кошки, в идеале - в разных комнатах. Лотки должны содержаться в чистоте, необходимо избегать остатков высохших фекалий, которые становятся летучими. Предпочтительно использовать закрытые лотки-домики и непылящий комкующийся наполнитель, чтобы минимизовать распространение микрочастиц фекалий.
Миски с кормом должны стоять как можно дальше от лотков с наполнителем.

ВАКЦИНАЦИЯ ОТ КОРОНАВИРУСА

Попыток разработать эффективную и безопасную вакцину от ФИП было предпринято множество, однако большинство из них были неудачными.
На сегодняшний день на рынке представлена интраназальная вакцина (спрей, впрыскиваемый в ротоглотку) от коронавируса кошек Primucell, Pfizer.

Вакцина изготовлена на основе температурно-зависимого штамма коронавируса, этот штамм способен к размножению только в ротоглотке, где более низкая температура, поэтому он вызывает местный иммунитет в воротах вхождения вируса, но продуцирует очень маленькое количество системных антител.

Данная вакцина эффективна против коронавируса и удовлетворяет требованиям безопасности, однако не получено убедительных доказательств в пользу ее эффективности от инфекционного перитонита, вызываемого коронавирусом. Кроме того, к моменту достижения возраста 16 недель (рекомендуемый срок первичной вакцинации) большинство кошек группы риска уже имели контакт с коронавирусом, а значит вакцинация не имеет смысла.

Кишечный коронавирус не является тяжелым заболеванием, поэтому вакцинация от него применяется редко, эффективность же от ФИП требует дальнейших исследований.
На 2014 год данная вакцина не включена в список рекомендуемых комитетом по вакцинации Всемирной ассоциации врачей по мелким домашним животным (WSAVA).

ЭЛИМИНАЦИЯ ВИРУСА (ВЫВЕДЕНИЕ ВИРУСА ИЗ ОРГАНИЗМА)

Вопросом скорейшим выздоровлением от коронавируса озабочены многие владельцы кошек и питомников. В интернете можно встретить самые фантастические многоступенчатые схемы выведения вируса, содержащие рекомендации по диете, курсам иммуномодуляторов из нескольких препаратов, витаминов, антиоксидантов, гомеопатических средств и т. п.
Как правило, авторы этих схем имеют отдаленное отношение к ветеринарии и еще более отдаленное - к принципам доказательной медицины.

Если речь не идет о бесконтрольном использовании набора иммуностимулирующих препаратов, любые действия владельца, направленные на «выздоровление» кошки не нанесут вреда животному, но едва ли повлияют на вирус.
Необходимо понимать, что рано или поздно абсолютное большинство кошек самостоятельно избавляются от вируса (в противном случае, смертность была бы очень высокой).

Важно понимать :
вероятно, практически безобидный кишечный коронавирус мутирует в смертельный неизлечимый ФИП при стрессе. Следовательно, чем меньше стресса, чем меньше населенность кошачьей популяции - тем больше шансов что при инфицированности коронавирусом ФИП не выработается.
Чем больше владельцы начинают экспериментировать, «лечить» и «выводить» вирус, особенно если это связано с принудительным введением каких-либо препаратов (обкалыванием кота иммуномодуляторами и запихиванием насильно в пасть горсти таблеток ежедневно длительное время) - тем больше стресса они вызывают у животного и тем самым сами повышают вероятность развития ФИП у своего животного!

Для кошек - носителей коронавируса наибольшая вероятность развития ФИП существует в возрасте до года (по некоторым данным до 3-х лет), поэтому если у вашей кошки приходит положительный анализ на коронавирус в более позднем возрасте, маловероятно, что у нее возникнет ФИП.

Меры, которые могут способствовать выведению коронавируса из организма или по крайней мере бессимптомному перенесению заболевания:

Хороший уход, поддержание высокого уровня гигиены;

Полноценное сбалансированное кормление высокобелковым рационом.

Существует мнение, что закисление среды желудочно-кишечного тракта, что достигается, прежде всего кормлением сырыми мясом/рыбой, может способствовать победе над коронавирусом, однако это не подтверждается никакими объемными исследованиями, кроме того, кормление сырым рационом закономерно повышает риск получения гельминтозов, токсоплазмоза и т. д.;

Антиоксиданты, такие как витамины A, C и E и цинк, возможно, оказывают противовирусное и/или иммуностимулирующее действие.

Все витаминные препараты можно применять только под контролем ветеринарного врача.
Нет необходимости продолжать использовать антиоксиданты дольше, чем несколько месяцев после того, как у кошки был риск заражения коронавирусом FCoV, более того, это может быть вредно.

ОСОБЫЙ УХОД

Так как очень вероятно, что мутацию коронавируса в FIP провоцируют различные стресс-факторы, то после рекомендации ветеринарного врача избегать стрессовых ситуаций для животного, многие владельцы начинают содержать зверя как инвалида, который в любой момент может умереть - не дают ему препараты от блох и глистов, не вакцинируют животное, отказываются от кастрации и от других операций, даже при наличии показаний, не посещают планово ветеринарного врача.

При отсутствии образования ветеринарного врача поведенческой медицины, для большинства владельцев «стресс» - вообще очень субъективное понятие, и полностью оградить своего питомца от стрессов мы не можем никогда, потому что для разных особей разные ситуации волнительны: для одной кошки стресс - прогулка вне дома, для другой кошки стресс - отсутствие прогулки вне дома, для одного животного не будет стрессом работающий рядом пылесос, другое животное страдает даже если в миске закончилась вода.

Что касается вакцинации и хирургических операций для животных с положительным анализом на коронавирус:
вакцинируют и планово оперируют только клинически здоровых животных, то есть, если у животного нет внешних признаков заболевания (повышенной температуры, рвоты, диареи, сниженного аппетита, истощения, обезвоживания, выделений из разных мест и т. д.) - его обязательно вакцинируют и его можно оперировать, даже если оно является носителем коронавируса.
Нет никаких данных за то, что данные процедуры повлияют на течение заболевания самим коронавирусом или его мутации в ФИП.

Если у животного с коронавирусным энтеритом есть симптомы заболеваний, то его лечат симптоматически и потом вакцинируют/при необходимости оперируют.

Если животное не страдает от неутолимого полового влечения и кастрация планируется планово, а не как избавление от мучений, то имеет смысл подождать. Скорее всего коронавирус в течение нескольких месяцев естественным путем покинет организм животного.

На этом всё. О вирусном перитоните кошек (ФИП) можно рассказать больше, но в рамках отдельной статьи, так как это два разных заболевания.

Если у вас остались вопросы, не стесняйтесь задавать их в комментариях к статье.

Коронавирусные инфекции кошек и собак вызываются представителями рода Coronavirus (семейство Coronaviridae). Основным проявлением коронавирусной инфекции у собак является диарея. V кошек коронавирусы вызывают энтериты и инфекционный перитонит, широко распространенные среди диких и домашних кошек.

Возбудителем коронавирусной инфекции у собак является Canine coronavirus, вызывающий острый коронавирусный энтерит. Заболевание передается при непосредственном контакте с носителем вируса (через слюну и фекалии). Данной инфекции подвержены собаки любого возраста, однако чаще всего поражаются щенки и ослабленные животные, которые уже перенесли другую болезнь, например парвовирусную инфекцию.

Основные симптомы заболевания - рвота и диарея, иногда с примесью крови, обезвоживание организма, потеря в весе, апатия. Через 3-4 недели после выздоровления может развиться повторное заболевание. При проведении диагностики коронавирусный энтерит собак необходимо дифференцировать от парвовирусного энтерита, аденовирусной инфекции кишечного типа и чумы плотоядных.

Коронавирусы, поражающие кошек, представлены двумя биотипами: FECV, или коронавирус энтерита кошек, и FIPV - вирус инфекционного перитонита кошек (2, 3). Носителями FECV является 16-50% домашних кошек, у которых вирус локализуется в тонком кишечнике, не вызывая заболевания или становясь причиной легкой диареи. В то же время у 5-12% носителей может наблюдаться мутация условно-патогенной кишечной формы FECV в патогенную (FIPV), что приводит к развитию болезни (2).

Инфекционный перитонит (ИП, FIP) кошек, заканчивающийся, как правило, летально, протекает в двух формах - влажной и сухой. Влажная (экссудативная) форма ИП характеризуется поражением кровеносных сосудов брюшной или грудной полостей, сопровождающимся выпотеванием плазмы в указанные полости (рис. 1). У больных животных, развивается асцит (рис. 2), а в случае скопления жидкости - нарушение функции дыхания. На серозных покровах органов брюшной полости формируются фибринозные наложения (рис. 3), в дальнейшем могут образовываться спайки. Вследствие нарушения функции печени наблюдается эктеричность склер и кожных покровов.

Сухая (неэкссудативная) форма ИП протекает без скопления жидкости в брюшной и грудной полостях. В этом случае страдают внутренние органы - головной мозг (рис. 4), печень, почки, поджелудочная железа, в 25% случаев наблюдаются поражения глаз (рис. 5) (5).

Поскольку эффективная схема лечения ИП пока не разработана, первостепенное значение имеют профилактические меры, направленные на раннее выявление вирусоносительства (1, 3).

Диагностика инфекционного перитонита кошек также представляет серьезную проблему. Традиционные методы выявления возбудителя, основанные на обнаружении антител к коронавирусам (РНГАи ИФА), дают до 60% ложноположительных результатов. Это обусловлено присутствием в кишечнике кошек условно-патогенных штаммов возбудителя (2, 3). В ряде зарубежных лабораторий применяется комплексная методика диагностики ИП, включающая определение:
- титра антител к коронавирусу;
- соотношения альбуминов/глобулинов в транссудате или плазме крови;
- уровня а-1 кислого гликопро-теина (AGP);
- цитологических и гематологических показателей (4).

Материалы и методы
В исследовании был использован штамм коронавируса «Багира» (5 1оg ТЦД50/мл) в разведениях, 8 изолятов коронавирусов кошек (FCoV), 2 изолята коронавируса собак (CCV) и суспензии вируса панлейкопении кошек и калицивируса кошек.
При испытании ПЦР-тест-системы использовался биологический материал здоровых кошек, животных с клиническими признаками ИП и кошек с неспецифическими симптомами. Среди исследованных животных были как содержащиеся в питомниках, так и находящиеся на индивидуальном содержании.
Биологический материал параллельно исследовался методами ПЦР и РИГА. С помощью ПЦР-системы исследовались фекалии, плазма крови, транссудат при специфическом асците, а методом РИГА - сыворотка крови и транссудат.

Серологические тесты проводились с использованием набора для выявления антител к коронавирусам плотоядных в РИГА (ТУ 9388-025-00494189-01). Биологический материал собак исследовался методом ПЦР.

Однако данное исследование требует значительных затрат времени и средств. В связи с этим эффективным методом диагностики ИП может служить полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая позволяет не только выявлять коронавирусы кошек, но и проводить дифференциацию условно-патогенных и патогенных штаммов исходя из различной локализации их в организме. При этом обнаружение вируса в фекалиях кошек свидетельствует о носительстве условно-патогенных штаммов (FECV), а в плазме крови или асцитной жидкости - о циркуляции в организме животного патогенных штаммов (FIPV) и, следовательно, о заболевании.

Цель настоящего исследования - испытание тест-системы для диагностики коронавирусной инфекции у кошек и собак на основе ПЦР.

Выделение РНК проводилось с использованием набора «РНК-сорб» (ЦНИИЭ), в основе которого лежит метод ее сорбции на силикагеле. ПЦР проводилась на амплификаторе ТЕРЦИК («ДНК-технология») по стандартной методике. Полученные ПЦР-продукты визуализировались методом электрофореза в 1,5% агарозном геле, содержащем бромистый этидий.

Результаты и обсуждение
В процессе исследования проведен анализ сведений о нуклеотидных последовательностях представителей семейства Coronaviridae, в частности различных изолятов коронавирусов кошек и собак, опубликованных в базах данных Entrez, GeneBank, EMBL и DDBJ. Кроме того, изучена литература, характеризующая структуру геномов FCoV, CCV и их генетическое родство с другими представителями семейства.

В качестве мишеней для специфических праймеров были выбраны две консервативные последовательности в гене нуклеокапсидного протеина. Специфичность предложенных праймеров изучалась с помощью компьютерных программ FASTA и BLASTA. В результате проведенной работы была выявлена гомология выбранных олигонуклеотидов только с генами нуклеокапсидного протеина FCoV и CCV и не обнаружено их значимой гомологии с нуклеотидными последовательностями иных видов семейства Coronaviridae, а также каких-либо других вирусов, бактерий или эукариот. Таким образом, предложенные праймеры, исходя из теоретических расчетов, должны обладать 100% специфичностью.

На следующем этапе исследования были оптимизированы условия выделения РНК вируса и проведения реакции обратной транскрипции и ПЦР, а также определены специфичность и чувствительность ПЦР-анализа. Размер ПЦР-продукта составил 350 пар нуклеотидов. Метод показал 100% специфичность и высокую чувствительность. Обнаружение коронавируса в фекалиях кошек свидетельствовало о носительстве его условно-патогенных штаммов в кишечнике, обнаружение FECV в транссудате и плазме крови - о развитии заболевания.

При исследовании методом РНГА положительным результатом считалось обнаружение у животного титра антител > 1:128. Однако это могло указывать как на вирусоносительство, так и на манифестированную форму инфекции. Кроме того, положительный титр мог быть обусловлен наличием контакта с коронавирусом ранее. В качестве материала от собак исследовались фекалии, и обнаружение в них РНК коронавируса свидетельствовало о заболевании, вызванном CCV.

В ходе эксперимента был исследован биологический материал, взятый у 193 кошек (таблица). Методом РНГА положительный результат был зафиксирован у 131 животного (титры антител > 1:128). При тестировании «сероположительных» кошек методом ПЦР РНК коронавируса была обнаружена в плазме и асцитной жидкости у 12 животных (9%), только в фекалиях - у 68 (52%) и у 51 (39%) - не обнаружена вовсе. Таким образом, 52% кошек с серопозитивным результатом являлись носителями условно-патогенных штаммов коронавируса, а 39% были здоровы. Очевидно, что исследование методом РНГА дало 63% ложноположительньгх результатов (в пересчете на общее количество исследованных животных).

Заключение
Полученные результаты свидетельствуют о том, что диагностика коронавирусной инфекции кошек традиционным серологическим методом (РНГА) дает более 60% ложноположительных результатов, поскольку не позволяет дифференцировать состояние носительства от истинного заболевания. Кроме того, "сероположительными» считались животные, имевшие контакт с коронавирусом ранее.

Использование метода ПЦР позволило провести дифференциацию условно-патогенных и патогенных штаммов в связи с их раз личной локализацией в организме и отличить состояние носительства от заболевания. Таким образом, данные проведенного исследования говорят о целесообразности использования метода ПЦР для выявления коронавирусов кошек и собак и постановки окончательного диагноза.

В соответствии с приказом № 45 Департамента ветеринарии МСХ РФ в период с 03.08.2004 г. по 06.08.2004 г. были проведены комиссионные испытания тест-системы для диагностики инфекционного перитонита кошек методом ПЦР. Тест-система успешно прошла комиссионную апробацию, показав 100% специфичность и высокую чувствительность в рамках предложенной панели. В настоящее время тест-система «Коронавир» для выявления и идентификации коронавирусов кошек и собак, основанная на ПЦР, успешно используется в ветеринарной практике (ТУ 9388-142-00494189-05; РУ № Р077-1-3.5-0813 зарегистрирована в РФ за № ПВР-1-3.5/01556 от 30.06.06 г. сроком на 5 лет).

ЛИТЕРАТУРА
1, Addie, D, D„ Jarrett, 0. Use of a reverse- transcriptase polymerase chain reaction for monitoring the shedding of feline coronavirus by healthy cats, Vet. Rec, 2001, May 26; 148 (21): 649-53,
2, Vennema, H, atal. Feline Infectious Peritonitis Viruses Arise by Mutation from Endemic Feline Enteric Coronaviruses, Virology, 1998:150-157.
3, Herrewegh, A.A., Mahler, M„ Hedrich, H.J., Haagmans, B.L Egberink, H.F., Horzinek, M.C., Rottier, P.J., de Groot, R,J, Persistence and evolution of feline coronavirus in a closed cat-breeding colony Virology 1997, Aug 4; 234 (2): 349-363,
4, Comparison of Different Tests to Diagnose Feline Infectious Peritonitis; Katrin Hartmann at al„ 2003.
5, Feline infectious peritonitis; Stacy E, Andrew, Veterinary clinics of North America: small animal; vol. 30, number 5, September 2000

Е.А. ЯРАЛОВА, И.Л. ОБУХОВ, ММ РАХМАНИНА, Э.И. ЭЛИЗБАРАШВИЛИ, В.И.УЛАСОВ,
Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов, г. Москва

ПЦР- это полимеразная цепная реакция, основанная на принципе копирования определенного участка нити ДНК. За счет многократного увеличения в объеме ДНК-материала, становится возможным обнаружить в микроскопе искомые бактерии. Преимуществом ПЦР является:

• высокая чувствительность;
• высокая специфичность;
• выявление острых и латентных инфекций;
• возможность выявления любого из ныне известных возбудителей.

ПЦР в ветеринарии

В настоящее время метод ПЦР диагностики нашел широкое применение в ветеринарии. Данный метод исследования позволяет в короткие сроки получить достоверный ответ. К тому же для его проведения необходимо очень малое количество биологического материала, в отличии, например, от общего анализа крови, что существенно упрощает работу ветеринарным врачам. Как у людей, так и у животных материалом для постановки ПЦР могут быть:

• кровь и ее компоненты;
• моча;
• биоптат желудка;
• слюна;
• соскобы эпителиальных клеток.

Проведение ПЦР-диагностики кошкам

Во время обследования кошки ветеринаром, для подтверждения или опровержения предполагаемого диагноза может возникнуть необходимость сделать анализ кошке на ПЦР. Причиной назначения такого исследования могут быть наиболее часто встречающиеся и в тоже время трудно диагностируемые заболевания, такие как перитонит, ринотрахеит, коронавирус, токсоплазмоз и др.

Особо тяжелым заболеванием, при котором необходим ПЦР-метод является вирусный иммунодефицит кошек. Этот вирус поражает не только иммунную, но и нервную системы животного. Организм кошки становится ослабленным и беззащитным перед бактериями и вирусами, в результате чего животное погибает от вторичных инфекций. И дабы исключить наличие этого вируса, ветеринарный врач рекомендует проводить кошке полимеразную цепную реакцию.

Данный метод, помимо многообразия преимуществ, имеет ряд недостатков. Все аппараты для ПЦР-диагностики очень чувствительны, и поэтому малейшее его загрязнение может дать ложный положительный ответ. Так же не маловажной считается дороговизна оборудования и реактивов, поэтому не каждая ветклиника в Москве может его приобрести. Однако, диагностика заболеваний без этого метода становится все более затруднительной, поэтому проведение анализа ПЦР у кошек в Москве можно сделать в нашей клинике обратившись по контактным телефонам, или оставив заявку на сайте.

Крылова Дарья Дмитриевна, молекулярный биолог, заведующая отделением ПЦР диагностики независимой ветеринарной лаборатории “Поиск”, г. Санкт-Петербург.

Для начала хотелось бы определиться, в чем же заключается смысл метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) с практической точки зрения, с точки зрения ветеринарного врача. Что же должен точно понимать доктор, назначающий анализ методом ПЦР… Я не буду вдаваться ни в какие сугубо профессиональные подробности молекулярных механизмов, задействованных при проведении ПЦР. Хочется только, чтобы ветеринарный врач четко осознавал: метод ПЦР является прямым, и при проведении такого исследования предполагается, что из того клинического материала, который прислан в лабораторию, возможно выделить нуклеиновую кислоту (ДНК или РНК) предполагаемого возбудителя. Это является главным постулатом. Но, несмотря на этот постулат, я очень часто сталкиваюсь с мнением, которое я назову Мифом 1 , о том, что любой возбудитель любого заболевания может быть обнаружен методом ПЦР в крови. Строго говоря, в данном случае кровь фигурирует как некий собирательный образ универсального материала для исследования. Часто от нас хотят, чтобы мы поработали «со всем и на все». Это невозможно, к сожалению. Как же определить, какой возбудитель может быть найден с помощью ПЦР, а какой нет? При отборе материала для исследования методом ПЦР доктор должен в первую очередь представлять себе патогенез заболевания или заболеваний, возбудителей которых он хочет обнаружить. Если прижизненный забор необходимого материала у животного невозможен, то не стоит назначать такую диагностику. В настоящее время в арсенале лабораторий есть множество доступных способов диагностики, например метод иммуноферментного анализа. Этот метод позволяет определить наличие антител к возбудителю, их количество и по определенным критериям с большой долей достоверности – статус заболевания. Для большей ясности можно рассмотреть конкретные примеры. В очередной раз остановимся на коронавирусе кошек и, конкретно, на инфекционном перитоните. В момент мутации вируса, находящегося в кишечнике кошки, он приобретает сродство к моноцитам. Заражая моноцит, вирус попадает в кровоток кошки, это бесспорный факт, но моноцит находится в кровотоке совсем недолго, в норме около 3 дней, а дальше он должен претерпеть свою окончательную дифференцировку в тканевой макрофаг. Поэтому моноцит вместе с коронавирусом уходит из кровотока через стенки сосудов в ткани, где становится макрофагом. Есть данные, что коронавирус еще и стимулирует ускоренную дифференцировку моноцита. Из этого следует, что коронавирус, несомненно, какое-то очень короткое время находится в периферической крови животного, и, конечно же, его можно там обнаружить, но это очень редкая находка, и диагностическая значимость исследования крови на наличие коронавируса методом ПЦР является нулевой, поскольку отрицательный результат такого исследования, к сожалению, не исключает наличия коронавирусной инфекции. Также иногда у доктора есть стремление найти в крови методом ПЦР парвовирус собак и кошек. Могу предположить, что такое желание основано на лейкопении, наблюдающейся при панлейкопении или парвовирусном энтерите. Вероятно, кто-то считает, что эта лейкопения является результатом уничтожения лейкоцитов вирусом непосредственно в кровотоке. Давайте рассуждать логически: парвовирус является ДНК-содержащим вирусом, а для успешного размножения и распространения ДНК-содержащему вирусу необходимо встроиться в геном хозяина, причем в клетки, активно делящиеся, иначе как вирус будет размножаться? Всем известно, что лейкоциты в норме в крови все же не делятся. А делятся их предшественники в костном мозге. Парвовирус поражает костный мозг, и лейкопения возникает в результате уничтожения клеток-предшественников в костном мозге. Также активно делящимися клетками являются клетки ворсин кишечника, где парвовирус успешно реплицируется, и самым хорошим материалом для исследования на парвовирусную инфекцию являются экскременты животного, с помощью которых вирус распространяется во внешней среде. В общем, коронавирус и парвовирус используют кровь только в качестве, условно говоря, транспортной среды для достижения конечной локализации и покидают кровоток достаточно быстро. Есть вирусы, которые вообще не выходят в кровоток. В качестве примеров можно привести калицивирус и герпесвирус кошек. Репликация этих вирусов чаще всего ограничивается лимфоидной тканью рото- и носоглотки. Калицивирусная инфекция может протекать системно, но это достаточно редкие и тяжелые случаи.

Раз уж речь пошла о вирусных инфекциях, хотелось бы отметить, что метод ПЦР очень точен и очень специфичен, но эта специфичность и лабильность генома вирусов, особенно РНК-содержащих, в реальности может привести к тому, что конкретная тест-система для исследования методом ПЦР может обнаруживать лишь какой-то определенный штамм или несколько штаммов конкретного вируса. В качестве примера опять-таки можно рассмотреть калицивирус кошек, который имеет огромное количество сильно отличающихся штаммов, а также постоянно обнаруживаемых новых изолятов. Поэтому, к сожалению, ПЦР-диагностика калицивируса дает много ложноотрицательных результатов.

Миф 2

Приоритетная значимость количественной ПЦР по сравнению с неколичественной

Количественная ПЦР является очень важным и мощным инструментом при мониторинге некоторых вирусных заболеваний. В диагностике человеческих вирусных заболеваний на настоящий момент валидировано несколько тест-систем для количественной оценки вирусной нагрузки вирусов гепатита В и С, а также вируса иммунодефицита человека. Это действительно важно для оценки лечения или поддерживающей терапии. Если говорить о животных, то количественная ПЦР также важна для оценки вирусной нагрузки у животного таких вирусов, как вирус иммунодефицита кошек и вирус лейкоза кошек. Однако доктор должен понимать, что количественная ПЦР возможна только в определенном материале, а именно в крови, поскольку отбор крови можно стандартизировать, плюс кровь является достаточно стабильной жидкостью организма. Количественная ПЦР на хламидиоз все же вызывает у меня некоторое недоумение. Не уверена, что так важно знать, например, количество хламидий, кроме того, это весьма затруднительно определить практически, поскольку невозможно универсально забрать несколько последовательных мазков. Врач не может быть уверен, что сегодня он забрал такое же количество конъюнктивального эпителия кошки, как и в прошлый раз. Мне кажется, что эффективность лечения хламидиоза у животного может быть вполне успешно оценена доктором визуально; при проведении ПЦР в реальном времени теоретически тоже достаточно хорошо видно, эффективно ли лечение, но тут возникает та же проблема, по которой результат количественной ПЦР может, мягко говоря, не соответствовать действительности – повторюсь – невозможность унифицированного забора. В общем, я бы не стала переоценивать значение количественной ПЦР в этих случаях, но если доктор все же решил, что он хочет действовать таким образом, тогда нельзя менять лабораторию в процессе мониторинга конкретного животного, поскольку универсальных валидированных тест-систем для количественной ПЦР в отечественной ветеринарии в настоящее время нет, и результаты, полученные в разных лабораториях, сравнить невозможно.

Миф 3

Значимость результата, полученного в «человеческой» лаборатории

Часто на форумах доктора из городов, в которых нет ветеринарных ПЦР-лабораторий, задают вопрос: как же все-таки провести диагностику на наличие возбудителя заболевания? К сожалению, бывают советы сдать анализ в «человеческую» лабораторию. И кто-то даже следует этим советам. Хочется еще раз повторить простую истину: большинство возбудителей у животных и человека все же различаются. В лаборатории, которая проводит исследования для людей, вам сделают анализ на хламидию, микоплазму, герпес человека. И еще, не дай бог, найдут все это в материале животного (такие случаи, к сожалению, нередки). На мой взгляд, если нет возможности провести исследование методом ПЦР в ветеринарной специализированной лаборатории, то лучше вообще не делать такого исследования, а проводить симптоматическое лечение.

Миф 4

Коммерческие лаборатории не работают с РНК

Для меня, скажу честно, это было откровением. Я слышала от многих людей, что лаборатория всегда и при всех обстоятельствах хочет только заработать, и для этого пойдет на любой обман. Вероятно, позиции прайсов об исследовании на разные РНК-содержащие вирусы также многими воспринимаются как обман. Хочется со всей ответственностью заявить, что конкретно наша лаборатория таким обманом не занимается, и мне кажется, что все остальные лаборатории тоже. Конечно, в силу многих факторов работа с РНК сложнее, чем с ДНК, но в настоящее время продаются прекрасные реагенты, значительно упрощающие жизнь при работе даже с такой нестабильной молекулой.

Миф 5

ПЦР может и должна быть дешевой

Нет, не может и не должна уж тем более. Для начала хотелось бы заметить, что постановка ПЦР представляет собой достаточно длительный и трудоемкий ручной процесс, требующий от человека, который этим занимается, высокой квалификации и понимания сложных механизмов. Но это лирика, естественно. Вторым немаловажным фактором является то, что реагенты для проведения ПЦР стоят дорого. Я не говорю о реагентике российского производства. К сожалению, ее качество такое, что, на мой взгляд, предпочтительнее и менее затратно получается пользоваться реагентами производства США и Европы. То есть я уверяю, что если хочется получать воспроизводимый адекватный результат и не иметь никаких осечек, то лучше не экономить. Исследование методом ПЦР в Англии, например, если перевести в рубли, стоит около 1500 рублей. А реагенты те же самые. Вероятно, там больше ценится труд специалиста, и есть понимание самого процесса. В нашей стране, к сожалению, многие врачи считают, что анализ в лаборатории полностью автоматизирован, а сотрудники только жмут кнопку. Работа мозга сотрудника лаборатории даже не рассматривается, нет осознания того, что не всегда все происходит по протоколу, и, чтобы опровергнуть или подтвердить диагноз доктора, люди выворачиваются наизнанку. Все стараются сдать анализ там, «где подешевле», не понимая, что качество при этом сильно теряется.

Миф 6

Лаборатория должна поставить диагноз

Справедливости ради стоит сказать, что такое бывает очень редко, но все же бывает. На мой взгляд, ответственность в постановке диагноза лежит целиком и полностью на враче. Лаборатория только помогает доктору подтвердить или опровергнуть его дифференциальные диагнозы. Ни один лабораторный метод не дает стопроцентной точности.

Миф 7

Если методом ПЦР не подтвердился ни один из дифференциальных диагнозов, значит, лаборатория плохая

Есть масса факторов, в силу которых можно получить ложноотрицательный или ложноположительный результат. Ошибиться могут все. И до 70% ошибок происходит в момент пробоотбора. У доктора в момент взятия материала на анализ, как правило, уже имеется мнение, чем болен пациент. И зачастую доктор абсолютно прав. Но если лаборатория выдает отрицательный результат, это не доказывает автоматически ее вину. Существуют универсальные правила забора материала, например, при подозрении на бактериальную инфекцию материал отбирают до введения антибиотиков. Если забор осуществили после двухнедельной антибиотикотерапии, то логично получить отрицательный результат, хотя у животного имелось именно то заболевание, которое предполагал доктор. Есть инфекции, адекватная диагностика которых требует временных и материальных затрат владельца. Например, возбудителя трихомоноза кошек можно не обнаружить в любой порции кала, для подтверждения диагноза требуется исследовать несколько образцов фекалий, собранных с интервалом в 8-12 часов. Часто владелец животного и врач считают это сложным. Да, они правы, но это не проблема лаборатории. При диагностике того же герпесвируса кошек нельзя отбирать материал после проведения флюоресцеинового теста, поскольку краситель, попавший в забранный материал, может заблокировать ПЦР. И это только несколько примеров среди огромного количества факторов, которые должны быть учтены врачом, желающим получить адекватный результат на свой запрос.

В заключение хотелось бы написать, что, к сожалению, у меня часто складывается впечатление некоего противостояния врачей и лаборатории, по крайней мере, в России. Врачи не доверяют лабораториям, лаборатории считают некомпетентными врачей, и т.д. Мне кажется, что такого противостояния быть не должно: лаборатория всегда должна помогать врачу, а для этого доктор должен делиться с ее сотрудниками полной информацией. Я могу точно сказать, что наша лаборатория старается помочь решить любую возникшую проблему, и мы всегда готовы обсудить какие-то непонятные моменты и произошедшие недоразумения.

Патология довольно редко протекает в острой форме или имеет значительное влияние на состояние здоровья человека - большинство пациентов даже не догадываются об инфекции. Но существует обстоятельство, когда токсоплазмоз крайне опасен - это беременность. Заражение во время вынашивания ребенка очень опасно - возбудитель способен стать причиной необратимых изменений в организме ребенка, вызвать его гибель еще до рождения.

Что такое токсоплазмоз? Характеристика заболевания

Токсоплазмоз классифицируют в зависимости от способа заражения:

1. Приобретенный - инфицирование происходит после рождения. Чаще всего протекает незаметно, без выраженной симптоматики, не приносит дискомфорта (хронический тип). Реже встречается острая форма - отличается заметными симптомами.
2. Врожденный - внутриутробное инфицирование плода. Заражение может стать причиной недоразвитости плода, уродств, инвалидности или смерти.

В зависимости от зоны их жизнедеятельности выделяют типы болезни:

1. Кардиологический - поражение сердечной мышцы, сопровождается соответствующей симптоматикой: слабость, боли в грудине, одышка.
2. Лимфонодулярный - поражение лимфатических узлов (их увеличение и болезненность при пальпации).
3. Офтальмологический - нарушения зрительной функции, поражение глаз при токсоплазмозе.
4. Менингоэнцефалический - нарушения нервной системы. Самый заметный признак - систематические головные боли.
5. Генерализованный - с одновременным поражением нескольких систем органов.

Причины и развитие токсоплазмоза

Существуют пути передачи токсоплазмоза:

1. При контакте с кошкой - простейшие в большом количестве содержатся в фекалиях животных, могут переноситься на шерсть, продукты питания, предметы мебели.
2. При поедании недостаточно хорошо обработанного зараженного мяса.
3. При переливании крови от донора, инфицированного токсоплазмами.
4. При пересадке зараженных внутренних органов.
5. Внутриутробная инвазия - плод инфицируется от болеющей матери.

Патология протекает незаметно у людей со сформированным иммунитетом, а в случае ослабленной защиты организма, инфекция может дать знать о себе ярко выраженными симптомами. Дефекты иммунитета могут быть вызваны такими серьезными болезнями, как СПИД, онкологические образования. Также активно проявляется болезнь у детей, при внутриутробной инвазии или приеме лекарств, подавляющих работу иммунной системы.

Чем опасен токсоплазмоз? Иммунитет к болезни

Для здорового взрослого человека токсоплазмы не опасны. Инвазия остается незамеченной, не наносит повреждений, которые отобразились бы на самочувствии заболевшего или функционировании внутренних органов.

Опасность существует лишь в случаях:

1. При беременности - внутриутробное заражение наиболее опасно - плод может получить увечья еще до рождения или погибнуть.
2. При тяжелых патологиях, угнетающих иммунитет - у больных СПИДом, пациентов с онкологическими опухолями, а также перенесших агрессивное лечение препаратами, подавляющими естественную защиту организма.

При опасном протекании токсоплазмоза, возбудитель может вызвать необратимые изменения в организме или даже стать причиной инвалидности, летального исхода.

Опасность токсоплазмоза может выражаться в изменениях в организме:

1. Паралич отдельных участков тела.
2. Кома.
3. Частичная потеря чувствительности.
4. Спонтанный выкидыш, замирание плода.
5. Слепота.
6. Глухота.
7. Воспалительные процессы в сердце, легких с последующей остановкой их работы (что становится причиной смерти пациента).

При внутриутробном заражении ребенок часто погибает в короткие сроки после рождения или же имеет патологии, существенно влияющие на его развитие и жизнедеятельность.

При перенесении токсоплазмоза формируется стойкий иммунитет на всю жизнь и в дальнейшем можно не бояться этой болезни даже при стремительном снижении иммунитета или при беременности.

Общие симптомы токсоплазмоза

Признаки заболевания очень обширны и зависят от степени развития патологии, ее локации в организме человека.

К общим симптомам токсоплазмоза относят:

1. Головная боль.
2. Повышение температуры тела (от 37 до 39 C).
3. Кожные симптомы токсоплазмоза: высыпания аллергического характера (крапивница).
4. Увеличение лимфатических узлов, их болезненность при пальпации.
5. Боли в мышечных тканях и суставах.
6. Увеличение селезенки и печени (заметно при пальпации).
7. Желтушность кожных покровов, глазного яблока.
8. Нарушения зрения (частичная или полная слепота, двоение изображения, вспышки).
9. Хроническая усталость, вялость, сонливость.

Подобную симптоматику часто путают с простудой, гриппом или ОРВИ.

Острая форма: симптомы

Острая стадия токсоплазмоза также чаще всего похожа на ОРВИ.

Самые характерные симптомы:

1. Повышение температуры.
2. Увеличение лимфатических узлов (шейных и затылочных).
3. Частые головные боли.
4. Боль в мышцах и суставах.
5. Общая слабость, потливость, быстрая утомляемость, сонливость.

Признаки острого токсоплазмоза исчезают через 5-7 дней. Если иммунная система исправно функционирует, болезнь больше не дает о себе знать. При наличии угнетающих факторов, токсоплазмы поражают тело локально, вызывают воспалительные процессы в органах, нарушая их работу.

Симптомы хронической формы

Хроническая форма имеет смазанную симптоматику, и заподозрить болезнь по ощутимым признакам тяжело.

Токсоплазмоз имеет те же признаки, что и любая вяло протекающая форма инфекции:

1. Головная боль.
2. Субфебрильная температура тела (37-37,5 C).
3. Увеличенные лимфатические узлы.
4. Слабость, хроническая утомляемость.
5. Снижение работоспособности, концентрации внимания.

Хроническая форма проявляется через 5-7 дней после попадания простейших в тело человека из-за контакта с кошачьими фекалиями или через 2-3 недели после поедания недостаточно обработанного зараженного мяса.

При наличии таких показаний к диагностике, врач назначает ряд анализов, направленных на выявление простейших и антител к ним в организме пациента. Комплекс исследований включает в себя опрос пациента (наличие симптомов, когда впервые возникли, не появились ли новые питомцы или не сменились ли недавно предпочтения в еде) и лабораторные анализы.

Анализы (помимо общего и биохимического исследования крови) информативны и позволяют точно диагностировать патологию и назначить лечение, если это требуется.

Токсоплазмоз при беременности - в чем опасность?

При этом важна тяжесть поражений, которую может вызвать токсоплазма: на сроках формирования внутренних органов плода (первый триместр) поражения будут самыми серьезными и часто несовместимыми с жизнью. При заражении сформировавшегося эмбриона в 3-м триместре урон будет незначительным и меньше повлияет на состояние здоровья малыша в дальнейшем.

Если результаты диагностики свидетельствуют об инфицировании матери до 24 недели беременности, то гинеколог рекомендует прерывание. При отказе от аборта назначается лечение.

Важно! Токсоплазма опасна для плода только в случае инфицирования женщины не более чем за 3 месяца до беременности или после зачатия.

Как определить время попадания инфекции в тело будущей матери?

Даже при выявлении острой стадии токсоплазмоза последствия для ребенка не всегда обязательны или опасны - возможно, ребенок избежит инфекции. Чтобы убедиться в этом, доктор рекомендует провести анализ околоплодных вод: путем прокалывания плодного пузыря через переднюю брюшную стенку, осуществляется забор материала для изучения. Такой метод будет информативен не ранее, чем через 30 суток после инфицирования женщины.

Симптомы токсоплазмоза при беременности не отличаются от протекания болезни в обычный период жизни.

К каким докторам следует обращаться, если у Вас токсоплазмоз?

Лечением токсоплазмоза занимается инфекционист. Но с подозрением на такой диагноз к нему попадают чаще всего по направлению от терапевта, офтальмолога, невролога, гинеколога (при планировании беременности).

Важно! Лечение проводится только в случае острого протекания болезни на фоне сбоев в работе иммунной системы или при беременности. Хронический токсоплазмоз не представляет опасности для женщины и ее будущего ребенка.

Переносчиками возбудителей гельминтозов чаще всего бывают животные. Самый распространенный путь заражения – пероральный. Однако роль переносчиков могут выполнять и некоторые насекомые, в частности, комары.

Симптомы дирофиляриоза

Дирофиляриозом люди заболевают после укуса зараженного комара. Возбудителем инвазии являются нематоды дирофилярии – нитевидные, круглые черви белого цвета. Длина взрослых особей колеблется в диапазоне 50…400 мм, ширина – 0,37…1,2 мм. Самки в два-три раза крупнее самцов.

Время распространения инвазии длится с апреля по октябрь – в зависимости от географической зоны. Чаще всего заражение происходит там, где много комаров, – в сельской местности, в прибрежных полосах водоемов и рек, заросших растительностью.

Механизм заражения следующий. Комар кусает инвазированную собаку, и вместе с ее кровью втягивает в кишечник личинки дирофилярий. Через 2 недели пребывания в комарином организме микрофилярии достигают инвазионной стадии и перемещаются в слюнные железы насекомого. Теперь комару, чтобы передать болезнь дальше, остается только укусить какое-то животное и внедрить в его тело готовые для развития микрофилярии.

Размножения дирофилярий в организме человеке в медицинской практике зафиксировано не было. Это объясняют тем, что внутри человеческого организма самцы и самки не встречаются. Из всего вышесказанного должно быть ясно, что больной для окружающих людей не заразен. И, тем не менее, для самого зараженного инвазия довольно опасна, а в некоторых случаях может закончиться даже смертью.

Различают две формы инвазии – подкожный и сердечный дирофиляриоз.

Главная опасность этой инвазии состоит в отсутствии выраженной симптоматики. В первоначальный момент заражения болезнь проявляет себя появлением на коже (месте, куда укусил комар) небольшой опухоли с ощущением жжения и зуда. Но это проявление поначалу редко связывается с гельминтами.

При поражении глаз (чаще всего одного) черви могут обитать непосредственно в глазном яблоке, коже век, в конъюнктиве. При этом ощущается присутствие чужого тела в глазу, веки воспаляются, отекают и зудят. Глаза с трудом открываются, при моргании возникает сильная боль. При всем этом острота зрения не падает.

Дирофилярии в половом органе и мошонке мужчин диагностируются редко. Проявляются они в виде небольших уплотнений, которые могут на время исчезать и снова появляться. Может возникать боль и дискомфорт, ощущаться перемещение чужеродного тела.

• Непродуктивный кашель, реже может появляться мокрота с кровью.
• Затрудненное дыхание, одышка.
• Снижение аппетита, потеря веса.
• Субфебрильная температура.

Интоксикация организма

При любой форме инвазии дирофиляриями организм интоксицируется, в результате чего страдает центральная нервная система. Появляется слабость, усталость, больной становится раздражительным, у него нарушается сон.

Лечение дирофиляриоза у человека

Основным способом лечения дирофиляриоза у людей является хирургическое вмешательство. Узлы и образования с гельминтами удаляются и при необходимости исследуются. При этом возникает необходимость исключить перемещение гельминта во время операции. Для этого больному дают дитразин.

После операции назначается ивермектин или его аналоги. Дополнительно может потребоваться прием:

• противовоспалительных препаратов для снятия воспаления;
• антигистаминных средств для борьбы с аллергией;
• успокоительных.

При глазной форме болезни операция проводится незамедлительно с последующим назначением противовоспалительных лекарств:

• левомицетина;
• колбиоцина;
• сульфата натрия;
• дексаметазона.

Назначаются антигистаминные средства: эриус, кларитин, зиртек, диазолин.

Диагностика

Когда-то считалось, что заражению дирофиляриями подвержены только животные, главным образом собаки. Но со временем были зарегистрированы случаи заражения дирофилярией людей.

Основным способом определения инвазии является диагностика по анализу крови. Он предполагает использование различных лабораторных исследований крови больного, в том числе таких.

Кроме крови может исследоваться моча больного. После извлечения гельминта проводится его макроскопическое исследование.

При диагностировании инвазии полезно изучение анамнеза, позволяющее выявить условия, при которых произошло заражение. Место пребывания больного, его контакты, отдыхал ли на природе, подвергался ли укусам насекомых и т. п.

Факторами, способствующими заболеванию дирофиляриозом, считается наличие бездомных и домашних кошек и собак, выезд на рыбалку, охоту, сбор грибов и ягод. Наличие у больного сада или дачи.

Профилактика заболевания

Профилактика заболевания предусматривает следующие мероприятия.

• Использование инсектицидов для уничтожения комаров и других насекомых, проникших в жилье, особенно, если их много.
• Защиту от комаров репеллентами и специальной одеждой при нахождении на природе, особенно, в вечернее и ночное время.
• Обязательное обследование при возвращении из туристических поездок или командировок из стран, где отмечается высокий уровень заражения.
• Защита домашних кошек и собак специальными ошейниками или иными средствами против кровососущих насекомых.

Поскольку источником болезни являются кошки и собаки, а комары выполняют лишь роль переносчика, нужно контролировать здоровье домашних животных. При заражении дирофиляриями домашние питомцы:

• теряют аппетит;
• становятся вялыми и пассивными;
• у них повышается температура;
• появляется кашель.

Дирофиляриоз у человека на фото

Дирофиляриоз – сравнительно редкая болезнь, многие врачи за всю свою практику так ни разу и не сталкиваются с ней. Поэтому желательно, чтобы люди, особенно живущие или работающие в эндемичных по этой инвазии зонах, хотя бы в общем знали симптомы и лечение дирофиляриоза у человека.

Фото дирофилярий во всех их стадиях и проявлениях легко могут заменить отсутствие личной практики. Впечатление у большинства людей они оставляют неизгладимое. Увидев один раз на фотографии, как выглядит червь под кожей или в глазу, его не трудно будет диагностировать и в собственном организме.

Полезное видео

Дирофиляриоз – неспецифическое, относительно редкое для человека заболевание. Но если заражение произошло, оно иногда требует дорогостоящего и длительного лечения. Важно диагностировать болезнь как можно быстрее.

При обнаружении на коже необычных узелков, ощущении присутствия чужеродного тела, особенно, если оно двигается, нужно немедленно обратиться к врачу. Промедление может привести к развитию гельминтоза и возрастанию ущерба для здоровья.

Анализ на описторхоз: общий, ифа, кала, где и как сдавать, расшифровка результатов

1. Какие анализы на описторхоз нужно сдавать
2. Анализ крови на описторхоз
3. Общий
4. Биохимический
5. Расшифровка результатов
6. Анализ кала на описторхоз
7. Как правильно сдавать кал
8. Где можно сдать анализы на описторхоз
9. В Москве
10. Сколько делается анализ и насколько он точен

Какие анализы на описторхоз нужно сдавать

Анализ на описторхоз - наиболее ценный метод диагностики. Лечащий врач может назначить больному следующие анализы: исследование каловых масс на наличие яиц гельминта, общий и биохимический анализ крови, ПЦР-диагностику, исследование антител к возбудителю инфекции, анализ мочи. Чаще всего назначают исследование кала и крови. Об этих методах речь пойдет ниже.

Анализ крови на описторхоз

восточный сосальщик ланцетовидный сосальщик печеночная двуустка сибирский сосальщик острицы аскариды головные вши лямблии сибирская двуустка кошачья двуустка кровяные сосальщики бычий и свиной цепни

В норме у человека антитела к возбудителю заболевания в плазме отсутствуют. Поэтому их обнаружение в сочетании с симптоматикой позволяют с уверенностью говорить о наличии инвазии.

Также периодически сдавать кровь на анализ рекомендуется пациентам, продолжительное время проживающим в районах эндемичных описторхозу, употребляющим не прошедшую необходимую термическую обработку рыбу, имеющим заболевания желчевыводящих путей и печени.

Выделяют следующие виды анализов крови на описторхоз:

• общий
• Биохимический
• Иммуноферментный

Общий

Общий анализ крови и биохимия используются на начальном этапе диагностики для установления общих признаков инфицирования.

Биохимический

Биохимический анализ крови – это комплексная лабораторная диагностика, проводимая с целью оценки состояния внутренних органов и систем и выявления потребности организма в микроэлементах и уровня ее удовлетворения. По биохимическим показателям состава крови проводят первичную диагностику функционирования печени, почек, поджелудочной железы и иных органов, получают данные об обменных процессах (липидном, белковом, углеводном метаболизмах).

Если при проведении биохимического анализа отмечается повышенный уровень билирубина, трансаминаз (АЛТ и АСТ), сулеймовой и тимоловой проб, амилазы (фермент поджелудочной железы) крови, то это косвенно позволяет подозревать описторхоз. Все эти показатели свидетельствуют о поражении внутренних органов (больше всего печени) и нарушении их функций.

ИФА

Суть метода состоит в том, что в лунки полистиролового планшета сорбируют (закрепляют) антигены возбудителя описторхоза Opisthorchis felineus в определенной концентрации.

Исследуемый образец (сыворотка крови) титруют последовательным разведением в каждой последующей лунке (например, 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 и т.д.). При наличии антител к Opisthorchis felineus происходит их связывание с антигеном, сорбированном на планшете. Эти антитела обнаруживают с помощью добавления меченного ферментом реагента (конъюгата), который специфически связывается с ними.

После добавления на конечном этапе субстрата — бесцветного вещества — происходит ферментативная реакция. Её результатом является окрашивание субстрата, интенсивность которого пропорциональна количеству выявленных (связанных с коньюгатом) антител. Результат оценивается спектрофотометрически или визуально.

Расшифровка результатов

О наличии или отсутствии гельминтоза говорят, если расшифровка результатов показывает увеличение некоторых компонентов крови или изменение некоторых характеристик:

Исследуемые компоненты и элементы крови	Описторхоз есть	Описторхоза нет
Эозинофилы	> 80-90%
Лейкоциты (кол-во на 1 л крови)	> 10 x10^9	4-9 х 10^9
СОЭ (ед. измерения мм/ч)	Выше нормы	От 2 до 10 у мужчин
		От 3 до 15 у женщин
		От 12 до 17 у детей
Гемоглобин (ед. измерения г/л)	Менее 100	От 120 до 160
IgM	Присутствуют при остром описторхозе	Отсутствуют
IgG	Присутствуют при хроническом описторхозе	Отсутствуют
Лимфоциты	Выше нормы	18-40% у взрослых
		от 30 до 75% у детей в зависимости от возраста
АЛТ (печеночный фермент, ед. измерения Ед/л)	> 40	От 10 до 40 в зависимости от возраста и пола
АСТ (печеночный фермент, ед. измерения Ед/л)	> 30	От 10 до 30 в зависимости от возраста и пола
Билирубин (ед. измерения мкмоль/л)	> 17,1	От 3,4 до 17,1 в зависимости от возраста и пола

Анализ кала на описторхоз

Обязательное условие диагностики на описторхоз – это исследование кала. При продолжительном течении болезни увеличивается вероятность выделения яиц глистов, а их численность укажет на степень тяжести инвазии.

Диагностика описторхоза по клинической картине заболевания трудна из-за отсутствия симптомов и синдромов, характерных только для данной болезни. Распознать описторхозную инвазию несложно через месяц после заражения, когда гельминты начинают откладывать яйца (овоскопическое исследование кала и дуоденального сока больного).

Большие затруднения встречаются в распознавании ранней фазы описторхоза. Наличие у новоселов в интенсивном очаге описторхоза лихорадки, гепатомегалии, эозинофильного лейкоцитоза заставляет подозревать раннюю фазу этого гельминтоза.

Описторхоз протекает при довольно разнообразных клинических явлениях. Поэтому необходимо тщательное клинико-лабораторное и рентгенологическое (в т. ч. ультразвуковое) обследование больных.

Яйца кошачьей двуустки у инвазированных чаще обнаруживаются при дуоденальном зондировании, чем в кале. При слабой инвазии их иногда находят лишь во время повторных зондирований. При исследовании кала по методу Фюллеборна яйца опускаются в осадок. Наиболее эффективен метод осаждения Горячева.

Как правильно сдавать кал

Сдача анализа кала предусматривает небольшую несложную подготовку. Перед забором материала рекомендовано опорожниться от мочи, а затем провести гигиенические процедуры с наружными половыми органами, это поможет предупредить попадание в кал влаги и капель мочи.

Фекалии для исследования нужно собирать в сухие емкости по типу «утки», вместо этого можно натянуть на сиденье унитаза пищевую пленку.

Другое условие получения достоверного результата – сдаваемый каловый образец обязательно должен быть свежим. По этой причине лучше всего использовать утренние порции кала, если это невозможно, образец до утра хранят в холодильнике.

Анализ кала на описторхоз будет точным при соблюдении таких условий:

• материал получен естественным путем (без применения слабительных препаратов, клизм);
• до сдачи анализа минимум за двое суток прекращают применение средств, которые стимулируют перистальтику кишечника;
• на протяжении нескольких суток соблюдалась здоровая диета.

Медики акцентируют внимание, что женщинам во время менструации лучше отказаться от сдачи анализа. В противном случае есть вероятность попадания в кал крови.

Для большей надежности следует брать кал в большом количестве, нежели при иных исследованиях, причем в разных местах.

Где можно сдать анализы на описторхоз

В Москве

Примерные цены по РФ:

• общий анализ крови ─ 400-500 руб;
• общий анализ мочи – 300-400 руб;
• биохимия крови ─ 800 руб;
• копрограмма – 350-500 руб;
• ПЦР – 800 руб;
• ИФА – 800-900 рублей.

Сколько делается анализ и насколько он точен

Длительность исследования зависит от разновидности анализа и места, где он был проведен. Обычно получение результатов занимает несколько дней, однако существуют лаборатории, где за дополнительную плату расшифровку могут выдать быстрее. Средняя точность результата - 70-80%.

👉Мнение экспертов о препарате.