Реклама на портале

Диагностика ВИЧ: методы исследования, сроки выполнения анализов. Способы диагностики вич-инфекции Диагноз вич инфекции считается лабораторно подтвержденным если

Производится несколькими разными методами. Казалось бы, ничего проще, чем выявить это заболевание посредством забора крови, нет. Но это не совсем так. Диагноз ВИЧ действительно можно выявить таким образом, но дальнейшее исследование производится разными методами. От них во многом зависит, какое лечение будет прописано пациенту, и какие меры будут приняты впоследствии. Среди самых распространенных и высокоэффективных методов принято выделять скрининговый анализ и иммунный блоттинг. Каждый из них следует рассмотреть более подробно.

СПИД диагностика: скрининговый анализ

Скрининговый анализ или метод исследования ИФА применяется на начальном этапе диагностики ВИЧ-инфекции. При разработке этого способа в лабораторных условиях искусственно создавались белки вируса. Они особым образом реагируют на антитела. Последние вырабатываются в организме при появлении в нем клеток, зараженных страшным недугом. Лабораторная диагностика ВИЧ в этом случае производится при помощи искусственных ферментов. Вступая во взаимодействие с антителами, они окрашиваются в определенный цвет. Полоска с индикатором после попадания на нее крови, помещается под специальный аппарат, с помощью которого удается определить, имеется ли у человека данное заболевание или нет. Современные методы диагностики ВИЧ, в том числе и ИФА позволяют определить факт заражения или его отсутствия с высокой точностью. Но, как и вся техника, аппарат для скринингового анализа имеет погрешность. Именно поэтому при необходимости анализ пересдается пациентом.

Важно знать, что ИФА тест - один из самых ранних методов определения наличия в организме вируса иммунодефицита. ВИЧ-инфекция - диагноз, который возможно выявить только через несколько недель после заражения. При попадании инфицированных клеток в кровь, иммунная система организма начинает активно сопротивляться. Происходит выработка антител, которые обнаруживаются методом лабораторного исследования спустя две или три недели. Ранняя диагностика ВИЧ-инфекции посредством ИФА теста позволяет выявить антитела к вирусу иммунодефицита в крови человека. В этом заключается ее основное отличие от других современных методов.

Стоит отметить, что у некоторых людей антитела к данному заболеванию начинают вырабатываться на более поздних сроках. С момента заражения до начала данного процесса может пройти от трех до шести недель. Именно поэтому специалисты в области медицины рекомендуют проходить скрининговый анализ спустя четыре - пять недель после незащищенного полового контакта или другой причины, по которой можно подозревать факт случайного заражения.

Методы лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции ИФА разрабатывались на протяжении длительного времени. На сегодняшний день существует четыре поколения тестов. Наиболее точными и эффективными из них считаются те, что были разработаны последними. Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции и СПИДа при использовании третьего и четвертого поколения ИФА тестов осуществляется при помощи рекомбинантных белков и пептидов. Чувствительность этих тестов к антителам, вырабатываемым организмом, составляет 92 - 93%. Речь идет о российских методах исследования. Европейцы научились делать подобные тесты с чувствительностью от 99%.

Современные методы лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции на основе ИФА используются не только для того, чтобы выявить наличие заболевания. С помощью скринингового анализа возможно проводить мониторинг распространения вируса иммунодефицита, а также забор тестового материала перед осуществлением взятия крови у доноров.

ИФА - стандартный метод диагностики ВИЧ инфекции: как осуществляется, почему дает ложный результат?

Диагностика ВИЧ и СПИД посредством ИФА - стандартная процедура. Забор крови у пациента производится из вены. Для анализа достаточно пяти миллилитров материала. Клиническая диагностика ВИЧ 2 и 1 типа производится минимум через восемь часов после приема пищи. Врачи рекомендуют проводить ее утром натощак. Результаты полного исследования бывают известны через два или три дня. Экспресс скрининг производится за меньшее время. Как правило, на это уходит всего несколько часов. Однако погрешность в этом случае увеличивается. Экспресс постановка диагноза ВИЧ необходима в экстренных случаях, например, когда больному нужна срочная операция. Такой анализ обязательно производится перед внеплановыми хирургическими вмешательствами, ведь при наличии у пациента вируса иммунодефицита, медики соблюдают повышенные меры безопасности. Клиническая диагностика ВИЧ-инфекции в короткий промежуток времени необходима и в том случае, когда забор донорской крови должен быть произведен быстро для спасения другого пациента.

Бывают случаи, когда человеку поставили диагноз СПИДа или ВИЧ, а в результате он не подтвердился или наоборот. Почему так происходит в случае с ИФА тестом? Ложноотрицательный результат может быть по причине того, что кровь была подготовлена к исследованию ненадлежащим образом. Иногда причиной этому становится неправильное выполнение ее забора. Ложноотрицательный результат при верификации диагностики ВИЧ-инфекции не подтверждается и в том случае, когда материалы для исследования были взяты слишком рано. Ведь после заражения должно было пройти не менее трех недель. Существуют случаи, когда результат обнаружения вируса иммунодефицита оказывается ложноположительным. Это связано с общим состоянием иммунной и гормональной систем человеческого организма. В большинстве случаев у пациента наблюдаются заболевания, которые и являются следствием ложноположительного результата. Речь идет об алкогольном гепатите, при котором печень вырабатывает особые ферменты, что может стать причиной неправильной формулировки диагноза ВИЧ. Беременность и некоторые аутоиммунные заболевания, наряду с множественной миеломой также могут стать причиной ложноположительного результата. В этот перечень можно включить пациентов на диализе и лиц, которые незадолго до дифференциальной диагностики ВИЧ проходили вакцинацию.

Говоря о скрининговом анализе, важно отметить, что этот метод исследования требует подтверждения. Врачи, перед тем, как ставят диагноз ВИЧ на его основании, обязательно отправляют больного на иммунный блоттинг.

Основные методы лабораторной диагностики ВИЧ инфекции: иммунный блоттинг

СПИД, диагностика и лечение которого тесно взаимосвязаны, выявляется сразу несколькими способами. Как уже говорилось выше, одного ИФА теста бывает недостаточно для того, чтобы окончательно определиться с диагнозом. Дифференциальная диагностика ВИЧ-инфекции в этом случае дополняется иммунным блоттингом. В современной медицине его называют окончательным подтверждающим методом постановки диагноза. Для исследования в этом случае используются белки, содержащиеся в крови пациента. Они разделяются в специальном геле, после чего у работников лаборатории появляется возможность изучить молекулярный состав крови.

Сроки диагностики ВИЧ при таком методе составляет от одного до трех дней. Для исследования из вены испытуемого берут кровь, которую помещают на тестер с гелем. Результат, который ставится под сомнение, может возникнуть при беременности, наличии онкологических процессов, туберкулезе. Ложноотрицательная реакция на тест может возникнуть при неправильном проведении исследования и в случае, если оно проводилось слишком рано. С момента заражения должно пройти не менее трех недель. Ведь то, через какое время диагностируется ВИЧ, напрямую зависит от состояния иммунитета.

Другие методы диагностики СПИДа и ВИЧ

Методы лучевой диагностики при СПИДе используются, как правило, в терминальной или вторичной стадиях. С их помощью удается установить изменения, которые происходят в организме из-за вторичных заболеваний или оппортунистических инфекций.

Биорезонансная диагностика ВИЧ, которую также называют нелинейным сканированием, для выявления вируса иммунодефицита используется в основном в частных клиниках. Официальная медицина считает такой метод недостаточно точным и эффективным. Возможно, усовершенствование нелинейной диагностики в будущем позволит выявлять этот страшный диагноз уже в инкубационном периоде.

Диагностика ВИЧ-инфекции: серологический метод и его особенности

Это сравнительно новая методика, при которой лабораторные критерии диагностики ВИЧ-инфекции основываются на принципе антиген-антитело. В случае с вирусом иммунодефицита происходит поиск антител к вирусу в организме человека. Для этого используется искусственным образом выведенный антиген, на который должны отреагировать антитела. Специфические серологические маркеры ВИЧ-инфекции вызывают специфические изменения в составе крови. Стоит отметить, что данный метод исследования наиболее эффективен в острой стадии, которая заканчивается сероконверсией. За ней следует бессимптомный латентный период, во время которого найти антиген бывает не просто.

Референс-диагностика ВИЧ-инфекции: описание и особенности

ВИЧ-референсные значения считаются наиболее точными в выявлении диагноза. Данный метод исследования объединяет ИФА тест и иммунный блоттинг. Референс-лаборатория диагностики ВИЧ позволяет осуществить забор анализов и последующую их обработку сразу двумя способами. Это позволяет в течение суток получить максимально точный результат. Перепроверка анализа, полученного в референс-лаборатории необходима лишь в том случае, если данные ИФА теста и иммунного блоттинга противоречат друг другу. Это достаточно редкое явление, которое чаще всего бывает у людей с вышеописанными сопутствующими заболеваниями.


В высокоспециализироваиной лаборатории проводятся:

А) определение циркулирующих в крови антител, антигенов и иммунных комплексов; культивирование вируса, выявление его геномного материала и ферментов;

Б) оценка функций клеточного звена иммунной системы. Основная роль принадлежит методам серологической диагностики, направленным на определение антител, а также антигенов возбудителя в крови и других биологических жидкостях организма.

Тестирование на антитела к ВИЧ осуществляют с целью:

А) безопасности гемотрансфузий и трансплантаций;

Б) эпиднадзора, тестирование в целях мониторинга превалентности ВИЧ-инфекции и изучения динамики ее распространенности в определенной популяции;

В) диагностики ВИЧ-инфекции, т. е. добровольное тестирование сыворотки крови практически здоровых людей или больных с различными клиническими признаками и симптомами, сходными с ВИЧ-инфекцией или СПИДом.

Система проведения лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции построена по трехэтапному принципу. Первый этап - скрининговый, предназначен для выполнения первичных исследований крови на наличие антител к белкам ВИЧ. Второй этап референтный - позволяет с помощью специальных методических приемов уточнить (подтвердить) первичный положительный результат, полученный на скрининговом этапе. Третий этан - экспертный, предназначен для окончательной проверки наличия и специфичности маркеров ВИЧ-инфекции, выявленных на предыдущих этапах лабораторной диагностики. Необходимость нескольких этапов лабораторной диагностики обусловлена прежде всего экономическими соображениями.

В практике применяется несколько тестов, позволяющих с достаточной степенью достоверности выявлять ВИЧ-инфицированных:

ИФА (ELISA)-тecт (твердофазный иммуноферментный анализ) выявления первого уровня, характеризуется большой чувствительностью, хотя и меньшей специфичностью перед нижеследующими;

Иммунный блот (Western-blot), весьма специфичный и наиболее используемый тест, позволяющий дифференцировать ВИЧ-1 и ВИЧ - 2;

Антигенемия р25-тест, эффективный в начальных стадиях заражения;

Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

В случаях массового скрининга образцов крови рекомендуется тестировать смеси сывороток от группы обследуемых, составленные с таким расчетом, чтобы конечное разведение каждого образца не превышало 1:100. Если смесь сывороток оказывается положительной, проводится исследование каждой сыворотки положительной смеси. Этот способ не ведет к потере чувствительности как в ИФА, так и в иммуноблоте, но снижает трудовые затраты и стоимость первичного обследования на 60-80%.

Иммунологические методы

1. количество Т хелперов,

2. соотношение Т4 иТ8,

3. состояние гиперчувствительности,

4. компенсаторная функция Т клеточной системы.

Проявляется гиперпродукцией иммуноглобулинов, они низко аффинны и материал организма расходуется еще больше.

Недостатки: проявляются поздно, некоторые иммунологические показатели могут быть при других инфекциях.

Клинические методы – м.б. сходны с другими заболеваниями, наиболее типичные проявления регистрируются на поздних стадиях, поэтому клиническая диагностика мало эффективна

Основной метод – серологический – реализуется в 2 этапа:

1 – скрининговое обследование – отбор проб к суммарным антителам ко всем белкам иммунного анализа. Этот этап дает 95% истинных результатов и 5% ложноположительных.

2 – подтверждающий метод – все пробы исследуют с помощью подтверждающего метода. Эта методика позволяет выявить антитела к вирусному белку. Положительный результат, когда обнаружены антитела не менее чем к 3 вирусным белкам, если к 1 или к 2 результат сомнительный и требует дополнительного обследования.

При первичной серодиагностике ВИЧ-инфекции проводится определение суммарных антител с помощью скрининговых отборочных тестов - ИФА и агглютинационных реакций. На втором (арбитражном) этапе используют более сложный тест - иммуноблот, позволяющий не только подтвердить или отклонить первоначальное заключение, но и сделать это на уровне определения антител к индивидуальным белкам вируса.

Интерпретация результатов анализа на антитела к ВИЧ

Достаточно большое количество различных факторов влияет на результат анализа на антитела к ВИЧ и среди них важное значение имеет время проведения анализа после возможного заражения.

В большинстве случаев антитела к ВИЧ можно обнаружить через 6–12 недель после заражения. Этот период от попадания вируса в организм до появления определяемого количества антител называется периодом положительной сероконверсии или периодом “окна”. Есть редкие случаи появления антител через 6 месяцев после заражения, а сообщения о выявлении антител только через 1 год не имеют доказательств. В настоящее время диагностическая служба использует новые генерации методов ИФА, которые позволяют выявить антитела к ВИЧ через 3–4 недели после заражения, а определенные комбинации этих методов, так называемые стратегии тестирования, сокращают период “окна” до 2–3 недель, т.е. дают возможность выявить антитела к ВИЧ как только они начинают вырабатываться в организме.

Отрицательный результат означает, что антитела к ВИЧ в крови обследуемого не обнаружены. Такое состояние называется серонегативностью и означает, как правило, что человек не заражен.

Отрицательный результат не дает никаких гарантий на будущее. Он констатирует только состояние в момент обследования. Существует незначительный шанс, что обследование проведено в период “окна”. Поэтому, если человек раньше рисковал заразиться ВИЧ и получил отрицательный результат тестирования, необходимо пройти повторное тестирование по крайней мере через 6 месяцев после рискованного события.

Положительный результат означает, что в крови обследуемого найдены антитела к ВИЧ. Такое состояние называется серопозитивностью – человек заражен ВИЧ. Важно понимать, что положительный результат свидетельствует только о ВИЧ-инфекции, а не о заболевании СПИДом. Тем не менее, крайне важно срезу по получению положительного результата обратиться ко врачу для получения консультаций и, если нужно, медицинской помощи, что позволит поддержать качество жизни на хорошем уровне длительное время.

Неопределенный результат. В редких случаях результат анализа на антитела к ВИЧ неясен. Лаборатория не может дать ответ серопозитивен человек или серонегативен. В таких обстоятельствах необходимо проконсультироваться с врачом, и еще раз пройти тестирование.



Диагностика ВИЧ-инфекции на ранних порах просто необходима. От этого зависит сложность терапии и развитие патологических осложнений. На сегодняшний день существует множество инновационных методов исследования для выявления столь страшного диагноза. Именно об этом и пойдет речь дальше.

Какие существуют методы диагностики ВИЧ-инфекции?

На самом деле существует много методик диагностирования ВИЧ. В среднем они разделены на подгруппы – лабораторное исследование, дифференциальное обследование и аппаратное. Кроме того, нужно учитывать этапы проведения диагностических мероприятий. Обо всем этом и других аспектах подробнее поговорим дальше.

Лабораторная диагностика

Для рассматриваемого метода диагностики необходима высокоспециализированная лаборатория. В таких условиях можно выявить следующие показания:
  • Определяются антитела, антигены возбудителей и иммунные комплексы.
  • При обнаружении вируса, его культивируют и выявляют геномный материал и ферменты.
  • Оценивается функциональность иммунитета.
  • Осуществляется эпинадзор и мониторинг превалентности вируса иммунодефицита человека.
  • Изучается динамика распространения, и определяется популяция.
  • Можно определить степень безопасности трансплантации и гемотрансфузии.
Если выявляется соответствующий ВИЧ-возбудитель, больной направляется на дополнительное обследование. После этого человека ставят на учёт для дальнейшего контроля прогрессирования болезни.

Дифференциальная диагностика

Дифференцируется заболевание по разным причинам:
  • При первых симптомах инфицирования ВИЧ, находящегося в фазе обострения, особенно если существует мононуклеозоподобный синдром. Диагностика отталкивается от таких патологий, как мононуклеоз инфекционного характера, сифилис, краснуха, аденовирус, лейкоз в острой форме, иерсиниоз, гиперкератоз.
  • Если ВИЧ переходит в стадию генерализованной лимфаденопатии персистирующего характера, тогда дифференцируются болезни, при которых лимфатические узлы увеличиваются. Например, лимфолейкоз, сифилис, токсоплазмоз, лимфогранулематоз. В этой фазе у больного симптоматика становится более выраженной.
  • Если обнаруживаются вторичные патологии, дифференцируется иммунодефицит, возникший на фоне приема некоторых групп препаратов – лучевая терапия, применение глюкокортикостероидных средств и цитостатических препаратов. Значительно снижается иммунитет и при таких заболеваниях, как миелома, лимфоидная лейкемия, онкологические новообразования и прочее.
  • Если ВИЧ локализуется в ротовой полости, тогда дифференцируются болезни слизистой оболочки рта.

Экспресс-диагностика

На сегодняшний день разработаны даже экспресс-тесты, благодаря которым уже через 15 минут можно определить наличие инфекции ВИЧ. Их существует несколько видов :
  • Самый точный тест – это иммунохроматографический. Тест состоит из специальных полосок, на которые наносится капиллярная кровь, моча или слюна. Если выявляются антитела к ВИЧ, то полоска имеет цветную и контрольную линию. Если ответ отрицательный – заметна лишь линия.
  • Наборы домашнего использования «OraSure Technologies1». Разработчик – Америка. Именно этот тест был одобрен организацией «FDA».
  • Существуют и прочие экспресс-тесты, но они не обладают одобрением специалистов, поэтому и нежелательны для проведения теста.

Если выявилась положительная реакция на вирус иммунодефицита человека, необходимо дополнительно провести соответствующее обследование в клинических условиях.

Ранняя диагностика

Ранняя диагностика ВИЧ существует для того, чтобы своевременно определить риски по поражению иммунитета. Благодаря этому болезнь купируется на начальных этапах, в результате чего инфицирование других внутренних органов снижается к минимуму.

Чтобы самостоятельно диагностировать патологию на ранних стадиях, обратите внимание на симптоматику, которая при этом существует:

Полимеразная цепная реакция

ПЦР или полимеразная цепная реакция используется для определения любого инфекционного возбудителя, в том числе и вируса ВИЧ. В данном случае выявляется его РНК, причем выявить возбудитель можно на очень ранних стадиях (после заражения должно пройти минимум 10 дней).

Это довольно дорогостоящая диагностика, но в некоторых случаях может давать ложный результат. Поэтому при обследовании на ВИЧ дополнительно применяются и другие методики.



Количественное выражение полимеразной цепной реакции нужно для определения скорости развития ВИЧ и осложнений, например, СПИДа. Это позволяет своевременно определить прогноз на длительность жизни ВИЧ-инфицированного больного.

Иммунный блоттинг

Иммунный блоттинг является последним методом обследования больного перед точной постановкой диагноза. В основе методики лежит использование специализированной полоски (нитроцеллюлозной) с вирусными белками. Врач собирает венозную кровь, после чего отправляет её на обработку. После этого процесса белки сыворотки разделяются в гелеобразной субстанции, исходя из молекулярной массы и заряда. Для этого используется аппаратура с действующим электрическим полем. Затем в данный гель помещается вышеуказанная полоска и промакивается, то есть подвергается блоттингу. Это осуществляется в специализированной камере.

Результат определяется по связыванию белков крови с белками, нанесенными на нитроцеллюлозную полоску. Если ВИЧ присутствует в организме больного, то просвечиваются единые линии. Существуют определенные показатели выявления линий, которые сигнализируют о наличии ВИЧ. Но бывают и заниженные цифры. В этом случае существует риск развития начальной стадии вируса иммунодефицита человека, образования онкологических опухолей, туберкулеза, трансфузии крови.

ИФА-тест

ИФА-тест относится к скрининговому методу обследования при подозрениях на ВИЧ. Исследование осуществляется в лабораторных условиях. Именно там создаются специфические белки заболевания, которые способны уловить белки, вырабатываемые человеческим организмом. При взаимодействии с реагентами меняется цвет индикатора. Таким образом, выявляется не сам возбудитель, а антитела к вирусу. Данный тест может выявить вирус иммунодефицита человека на ранних стадиях развития.

Существует несколько видов ИФА тестов, но используются только последние разработки – 3 и 4 поколение. Методика основана на сборе кровяной жидкости из вены. Существует определенная подготовка – пациент не должен потреблять пищу на протяжении 8-ми часов до сдачи анализа. Поэтому кровь собирается натощак в утреннее время.

Как проводят диагностику во время инкубационного периода?

Инкубационный период вируса ВИЧ составляет 90 дней. В этот промежуток выявить наличие патологии сложно, но это сделать можно посредством ПЦР.

После этого на протяжении года человек находится под пристальным вниманием докторов и проходит множественное обследование. Только через этот период можно с точностью установить диагноз – ВИЧ.

Особенности диагностики у детей

Если рождается ребенок у женщины с диагнозом вируса иммунодефицита человека, младенец обследуется на протяжении 3-х первых лет жизни. Дело в том, что антитела матери могут этот период находиться в кровяной жидкости ребенка. Но при этом даже анализы крови не подтверждают инфицирование. Конечно, существует множество случаев, когда болезнь устанавливается сразу же после рождения. Подробно о беременности при ВИЧ-инфекции .

Первые анализы на ВИЧ у ребенка берут на вторые сутки после появления на свет. Потом по достижении 2-х месяцев, затем каждые 4 месяца.

Для выявления патологии в детском возрасте используются серологические методики обследования, ПЦР. Именно последний вид диагностирования недуга позволяет выявить на первых месяцах жизни младенца ДНК и РНК вируса. Для этого у малыша осуществляется сбор крови, которая впоследствии размещается в пробирку, содержащую консервант ЭДТА. Далее материал хранится 2 дня при температуре, не превышающей 8-ми градусов. Но и замораживать кровь не допустимо. Также может быть использована и сухая кровяная жидкость, которая получена из цельной крови и высушена.


Этапы проведения диагностики

Диагностические мероприятия по выявлению вируса иммунодефицита человека проводятся в три основных этапа:
  • Предварительная сортировка, она же скрининг.
  • Референтная диагностика.
  • Подтверждающий этап или экспертная диагностика.

Скрининг – предварительная сортировка

Предварительный этап обследования позволяет определить общие антитела посредством иммуноферментного анализа, то есть ИФА. Можно получить информацию о наличии вируса уже через 3 месяца после заражения. Но были зафиксированы случаи выявления возбудителя в более ранних стадиях – через 3 недели.

Нужно знать, что ИФА может при некоторых условиях дать ложноположительный результат. Это может быть в период вынашивания ребенка, при аутоиммунных болезнях (псориазе, ревматизме, волчанке и т. д.), заболевании Эпштейн-Бара и прочих патологиях.

Референтная диагностика

На данном этапе используются разнообразные тестирования минимум дважды, максимум трижды. Если в двух случаях результат положительный – требуется этап подтверждения.

Подтверждающий этап – экспертный

На данном этапе проводится диагностика с помощью иммунного блоттинга. Определяются антитела соответственно к определенным белкам возбудителя. Результат обычно точный, но бывают и случаи ложного положительного ответа. Такое возможно при терминальной степени развития СПИДа и в период затишья заболевания ВИЧ. Поэтому важно через определенное время пройти процедуру дополнительно.

Ошибки при проведении диагностики


Как это ни парадоксально, но существует возможность получения ложноположительного результата. Обычно такое происходит при домашнем тестировании, особенно в случаях использования экспресс-тестов. В клинических условиях такое возможно только при определенных заболеваниях или положениях:

  • период беременности;
  • перекрестная реакция организма;
  • аутоиммунные патологические нарушения;
  • простудные заболевания в стадии обострения;
  • онкологические новообразования;
  • туберкулез;
  • склероз.

Особенность – если человек инфицирован вирусами и грибками, то результат тестирования может быть тоже ложным. Особенно такое отмечается при аллергических состояниях.

Подготовка к сдаче анализов

Очень важно соблюдать правила подготовки к сдаче анализов на ВИЧ, потому что от этого зависит точность получения результата:
  • В первую очередь, Вам необходимо посетить соответствующего специалиста, чтобы он дал Вам точные указания по мероприятиям подготовки.
  • Анализы крови собираются всегда натощак. Поэтому перед выходом в клинику нельзя ничего кушать. Ваше последнее потребление пищи должно осуществляться не позже 21:00.
  • Запрещено курить в день сдачи анализов.
  • Нельзя накануне употреблять алкогольные напитки.
  • Если Вы принимаете какие-либо медикаменты, обязательно заранее проконсультируйтесь с доктором. Потому что многие препараты перед сдачей анализов на ВИЧ применять запрещено.
  • Не рекомендовано за несколько дней до сбора анализа проводить ультразвуковое исследование.
  • Не желательно за день-два до процедуры кушать чрезмерно жирные блюда и потреблять много сладостей.

Диагностика ВИЧ-инфекции (видео)

Вы можете узнать более подробно о различных методах диагностики ВИЧ от квалифицированных специалистов. Для этого стоит просмотреть следующее видео.

Диагностика ВИЧ-ИНФЕКЦИИ

Клиническая диагностика. Дифференциальный диагноз

Ранняя диагностика ВИЧ-инфекции обеспечивает своевременность терапии больного и развертывание профилактических мероприятий в очаге, предупреждающих неумышленную передачу вируса от инфицированного здоровому человеку. Наконец, ранняя диагностика позволяет своевременное проведение диспансеризации, психологической помощи, социальной реабилитации. Первые успехи в терапии больных позволяют при ранней диагностике значительно продлить жизнь больным и даже надеяться на излечение.

Сложность ранней диагностики, базирующейся на клинической картине заключается в неспецифичности, полиморфности симптоматики в стадии II, уже не говоря об отсутствии клиники в стадии I. Тем не менее во всех случаях немотивированной утомляемости, наличия ночных потов, головной боли, особенно на фоне кратковременной лихорадки (3-10 дней) с температурой 38-38,50 С, сопровождающейся тонзиллитом, длительного диарейного синдрома, похудания за короткое время, необходимо в первую очередь исключить ВИЧ-инфекцию. Постановке диагноза в этот период помогает выявление при объективном обследовании разнообразной кожной сыпи (пятна, папулы, розеолы, гнойнички) или фурункулеза. Наличие лимфаденопатии, даже в случаях увеличения одной группы лимфатических узлов и тем более при генерализованной уже с большей долей вероятности позволяет заподозрить клинически ВИЧ-инфекцию. Для болезни особенно характерно увеличение заднешейных, подчелюстных, над- и подключичных, подмышечных и локтевых лимфатических узлов. Как правило, они увеличиваются размером до 2-5 см в диаметре, безболезненны, плотно-эластичной консистенции, изредка сливаются в конгломерат. Весьма характерно для ВИЧ-инфекции увеличение более чем одного узла, более чем одной группы (за исключением паховых), длящееся свыше 3 мес.

Нередко в ранней фазе болезни наличие психо-неврологической симптоматики: чувство тревоги, депрессия, шаткость походки, снижение остроты зрения, судорожные припадки с признаками поражения психо-эмоциональной сферы (нарушение памяти, забывчивость, неадекватность поведения, притупление эмоций). К наиболее характерным признакам ранней стадии ВИЧ-инфекции относятся:

1. Снижение массы тела менее, чем на 10%;

2. Изменения на коже и слизистых оболочек (себорйный дерматит, фолликулит, пруриго, псориаз, грибковые поражения ногтей, рецидивирующие язвы в полости рта, некротический гингивит);

3. Опоясывающий герпес у лиц моложе 50 лет;

4. Рецидивирующие инфекции верхних дыхательных путей;

В промежуточной стадии болезни, характеризующейся клиникой развернутой суперинфекции, сформировавшейся в результате иммунодефицита наиболее характерны:

1. Прогрессирующее снижение массы тела свыше 10%;

2. Диарея неясного генеза, продолжающаяся свыше 1 мес..;

3. Кандидоз полости рта;

4. Лейкоплакия;

5. Туберкулез легких;

6. Периферическая нейропатия;

7. Локализованные формы саркомы Капоши;

8. Диссеминирующий опоясывающий герпес;

9. Тяжелая, рецидивирующая бактериальная инфекция (пневмония, синуситы, пиомиозит).

Для поздней стадии, позволяющей диагностировать ВИЧ-инфекцию, или, во всяком случае, проводить дифференциальную диагностику, относятся:

1. Пневмоцистная пневмония;

2. Токсоплазмоз;

3. Криптококкоз;

4. CMV-инфекция;

5. Простой герпес;

6. Прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия;

7. Гистоплазмоз;

8. Кандидозный эзофагит;

9. МАК-инфекция;

10. Сальмонеллезная септицемия;

11. Внелегочной туберкулез;

12. Лимфома, саркома Капоши;

13. Кахексия;

14. ВИЧ-энцефалопатия.

В 1988 ВОЗ предложила в целях клинической диагностики проводить балловую оценку симптомов, имеющихся у подозреваемого на ВИЧ-инфекцию больного:

  • Персистирующая генерализованная лимфаденопатия0
  • Изменения на коже и слизистых оболочках1
  • Снижение массы тела1
  • Выраженная утомляемость1
  • Простой герпес2
  • Диарея длительностью свыше 1 мес.4
  • Лихорадка длительностью свыше 1 мес. 4
  • Снижение массы тела свыше 10%4
  • Туберкулез легких 5
  • Рецидивирующая бактериальная инфекция5
  • Лейкоплакия полости рта5
  • Стоматит, молочница рта5
  • Локализованная саркома Капоши8
  • Кахексия12

При этом сумма баллов от 0 до 3 оценивается как вероятность ВИЧ-инфекции очень мала, 4 -11 баллов - заболевание вероятно, а 12 и свыше - очень вероятно.

В целом клиническая диагностика ВИЧ-инфекции – это, прежде всего диагностика спектра СПИД-ассоциированной патологии у больного вторичным иммунодефицитом. Так как ВИЧ-индикаторные заболевания включают 23 нозологические формы, наиболее целесообразен синдромальный подход к диагностике. Почти всегда имеет место у больного синдром общей интоксикации (немотивированная слабость, вялость, быстрая утомляемость) развивающийся на фоне длительного субфебрилитета или лихорадки неясного генеза, чаще в ночное и утреннее время, сопровождающейся обильным потом. Постоянен синдром немотивированной генерализованной периферической лимфаденопатии, в 20% сопровождающийся гепато- спленомегалией различной степени выраженности. Один из ведущих синдромов болезни - синдром бронхо-легочной патологии, правда глубокие поражения легочной ткани в виде пневмоцистной пневмонии развиваются в далеко зашедших случаях болезни, ибо развивается пневмоцистоз на фоне глубокого иммунодефицита. Зато длительностью свыше 1 месяца синдром немотивированной диареи относится к рано появляющимся, для него характерна устойчивость к медикаментозной терапии. Один из синдромов ВИЧ-инфекции - волнообразно текущая артралгия неясной этиологии. К характернейшим проявлениям болезни следует отнести и синдром поражений кожи и слизистых, проявляющийся неспецифической макуло-папулезной сыпью, устойчивой к терапии стероидами экземой, стафилококковым импетиго. К дерматологическим проявлениям также относятся рецидивирующие грибковые (микоз, кандидоз, бактериальные (фолликулиты, фурункулез, гидроаденит), вирусные (герпес) поражения кожи и слизистых оболочек. Наконец, ВИЧ-инфекцию характеризуют и новообразования, в основном в виде саркомы Капоши и лимфомы, а также некоторых других видов опухолей.

Наличие у пациента не менее двух клинических и двух клинико-лабораторных (лейко- лифо- нейтропения, гипогаммаглобулинемия) из числа вышеперечисленных симптомов позволяет с высокой степенью уверенности диагностировать ВИЧ-инфекцию. Но в то же время в случае выявления двух из таких весьма часто встречающихся у больных синдромов, как лихорадка и лимфаденопатия, сохраняющихся на протяжении месяца и свыше, стойкая немотивированная диарея, снижение массы тела более чем на 10% или обильные ночные поты дают основание на постановку диагноза и тщательного лабораторного обследования.

В стадии I заболевание можно заподозрить только по симптому персистирующей генерализованной лимфаденопатии у больного из группы риска или при наличии эпиданамнеза.

В стадии II (ранней или слабовыраженной) еще сохраняется соматическое благополучеие, нормальная активность. Поражения кожи и слизистых оболочек нетяжелые, рецидивирующие инфекции респираторного тракта не носят генерализованного характера, потеря массы тела не превышает 10%.

Согласно рекомендациям ВОЗ, надежная клиническая диагностика ВИЧ-инфекции у взрослых и детей возможна при наличии одного из 12 СПИД-индикаторных заболевания: 1) кандидоз пищевода, трахеи, бронхов, легких; 2) внелегочной криптококкоз; 3) криптоспоридиоз с диареей более одного месяца; 4) цитомегаловирусное поражение какого-либо органа (за исключением и помимо печени, селезенки и лимфатических узлов у больного старше 1 месяца); 5) инфекция, обусловленная вирусом простого герпеса, персистирующая более 1 месяца у больного старше 1 месяца; 6) саркома Капоши у больного моложе 60 лет; 7) лимфома головного мозга у больного моложе 60 лет; 8) лимфоцитарная интерстициальная пневмония у ребенка до 13 лет, 9) диссеминированная инфекция, вызванная бактериями группы Micobacterium avium intracellulare или M.Kansassii; 10) пневмоцистная пневмония; 11) прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия; 12) токсоплазмоз центральной нервной системы у больных старше 1 месяца. Наличие одного из этих заболеваний позволяет диагностировать ВИЧ-инфекцию при отсутствии серологического иммуноферментного исследования крови или даже при получении серонегативного результата.

Не менее сложна дифференсация фаз болезни, т.е. разграничение стадий по клиническим критериям. По мнению специалистов CDC (США) наиболее объективный критерий - количество Т-хелперов, а не клинические проявления, ибо многие из этих состояний часто встречаются у лиц, не инфицированных ВИЧ. В 1991 году Центр определил, что постановка диагноза СПИД может быть в случаях, если: а) у инфицированного имеется одно из 23 СПИД-ассоциированных состояний или б) он ВИЧ-инфицирован и имеет менее 200 СD4+ клеток/ мм.

Лабораторная диагностика

Обследованию на ВИЧ-инфекцию в первую очередь подлежат:

2. Лица с клиникой кандидозного эзофагита, кандидоза бронхов и легких, диссеминированного или внелегочного кокцидиомикоза, пневмоцистной пневмонии, внелегочного криптококкоза, криптоспоридиоза с диареей юлительностью свыше 1 мес., цитомегаловирусного поражения внутренних органов кроме печени, селезенки, лимфатических узлов у больных старше 6 мес., цитмегаловируснго ретинита с потерей зрения, герпетической инфекции с многоочаговыми язвами длительностью свыше 1 мес., бронхитом, пневмонией или эзофагитом, рецидивирующего опоясывающего герпеса, дессиминированного или внелегочного гистоплазмоза, туберкулеза легких или внелегочного, изоспориоза с диареей длительностью свыше 1 мес., распространенной или внелегочной МАК-инфекции, прогрессирующей многофокусной лейкоэнцефалопатии, токсоплазмоза мозга, сальмонеллезной септицемии, саркомы Капоши, лимфомы, лимфоидной интерстициальной пневмонии (у детей)

Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции базируется на трех направлениях: а) индикация ВИЧ и его компонентов, б) выявление анти-ВИЧ, в) определение изменений в иммунной системе.

Среди существующих методов лабораторной диагностики наиболее распространены серологические - выявление антител к антигенам вируса.

В состав ВИЧ входят структурные гены gag (group-specific-antigens), pol (polymerase) и env (envelope), кодирующие трансляцию белков, из которых строится вирус. Группу регуляторных генов ВИЧ составляют tat, трансактиватор всех вирусных белков, rev, регулирующий экспрессию вирусных белков, vif, являющийся вирусным инфекционным фактором, nef - негативный фактор экспрессии и vpx и vpr, функция которых пока не установлена. Ген gag кодирует белки сердцевины вируса и первичным продуктом трансляции его является р53 - белок-предшественник, расщепляющийся на три (р15, р17 и р 24) или с образованием при расщеплении первоначально промежуточного белка р39, который затем расщепляется на белки р17 и р24. У ВИЧ-инфицированных в большинстве случаев образуются антитела именно к этим антигенам, причем антитела к р24 выявляются на ранней стадии инфекции, ибо р24 более иммуногенен, чем р17. Ген роl кодирует белки р51/66 и р31, представляющие собой реверстранскриптазу и эндонуклеазу вируса.

Для выявления антител при ВИЧ-инфекции в основном используют иммуноферментный анализ (ИФА) и иммуноблотинг (ИБ). В первом случае выявляются суммарные антитела к белкам ВИЧ, во втором - к отдельным белкам (табл. 54). В основе ИФА лежит иммобилизация вирусных антигенов на планшетах, на которые сорбируются антитела больного, а комплекс антиген-антитело выявляется с помощью коньюгата антивидового иммуноглобулина с ферментом. Метод довольно специфичен (99%) и достаточно чувствителен (93-99%), позволяет выявлять вирусспецифические антитела у 95% инфицированных. Отрицательные 5% случаев приходится на ранние этапы инфицирования, когда антител еще мало в сыворотке крови или на терминальные фазы болезни, когда организм уже не в состоянии синтезировать антитела в силу резкого истощения иммунной системы. Кроме того в ходе инфекционного процесса наблюдаются периоды исчезновения антител из крови, что также обусловливает отрицательные результаты ИФА. Наоборот, возможны ложноположительные данные ИФА, в основном у больных с аутоиммунными заболеваниями, при инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр, когда происходит перекрестная реакция антител к ревматоидному фактору, вирусу Эпштейн-Барр или к молекулам главного комплекса гистосовместимости. Встречаются подобные ложноположительные реакции в 0,02-0,5% случаев.

Таблица 54. Выявление антител к белкам, кодируемым генами ВИЧ

Гены ВИЧ Белки-продуценты генов ИФА Иммуноблот

Определение суммарных антител к белкам ВИЧ Определение антител к отдельным белкам

GAG р15, р17, р24, р55 - II - - II -

POL р31, р51, р66 - II - - II -

ENV gp41, gp120, gp160 - II - - II -

Сравнительно высокий процент ложно-положительных реакций в ИФА в данном случае объясняется качеством тест-систем, но расхождения даже ниже, чем в экономически развитых странах. Сейчас внедряется в практику тест-системы 3-4 поколения, в основе которых лежит использование в качестве антигена: а) лизатов ВИЧ-1, б) рекомбинантных белков ВИЧ-1, в) введение антигенов субтипа “О” ВИЧ-1, г) коньюгаты, позволяющие определять IgM, IgG, IgA. Все это снижает частоту ложноположительных реакций ИФА при диагностике ВИЧ-инфекции, дает возможность раннего выявления сероконверсии. Улучшение тест-систем, выпускаемых некоторыми фирмами, обусловило более высокую чувствительность, чем иммунный блот, используемый для подтверждения специфичности ИФА. Поэтому ИФА с некоторыми тест-системами может использоваться не только как метод для скрининговых исследований, но и подтверждающих.

Антитела к основным внутренним белкам (р17, р24) обнаруживаются у 3/4 инфицированных и примерно у половины больных СПИДом.

Иммуноблотинг используется при диагностике ВИЧ-инфекции в качестве экспертного метода. ИБ сочетает в себе определение антител к отдельным белкам вируса с предварительным электропереносом на нитроцеллюлезную полоску (стрип) антигенов. В ИБ чаще всего выявляются антитела против gp41, обнаружение же в ИБ антител против р24 при профилактических обследованиях не дает оснований для окончательного решения вопроса об нфицировании. Используемый в последнее время рекомбинантный белок для ИБ улучшает оценку результатов. Ход лабораторной диагностики, применяемой в нашей лаборатории, предствлен на рис. 21.

По нашим данным при использовании тест-систем ведущих фирм мира у больных ВИЧ-инфекцией в иммунном блотинге во всех случаях выявляются антитела к gp160 и лишь у трети (38,8%) к р15 (табл.55).

Таблица 55. Выявляемость антител к белкам ВИЧ в иммунном блоте

Антитела к белкам ВИЧ % выявления Антитела к белкам ВИЧ % выявления

gp160 100 gp41 84,4

gp120 91,1 p31-34 84,4

p65-68 93,3 p24-25 100

p55-52 93,0 p17-18 80,0

p51 p17-18 38,8

ВОЗ (1991) предлагает следующий принцип оценки результатов иимунного блота: а) положительный результат - обнаружение в сыворотке крови антител к двум вирусным белкам из группы env с наличием или отсутствием белков - продуцентов gag и pol; б) отрицательный результат - отсутствие каких либо антител и в) неопределенный результат - обнаружение в сыворотке крови антител к белкам из группы gag и pol. Чаще всего неопределенный результат связан с белками- продуцентами экспрессии гена gag ВИЧ-1 р15/17, р24 и р55, ибо в этих случаях возможны или инфицирование или ложноположительный результат. В подобных случаях, если обследуемый не относится к группе риска, а повторный анализ не дает нарастания титра антител, скорее всего человек не инфицирован. Окончательное же решение вопроса о диагнозе возможно только при проведении более высокочувствительных, экспертных методов исследования: пероксидазной цепной реакции, ДНК-зондов или культивирования вируса. Среди серологических методов в случае неопределенных результатов ИБ используется в качестве экспертной диагностики радиоиммуно-преципитация (РИП).

В основе РИП лежит использование белков вируса, меченых радиоактивным йодом, а преципитаты выявляются с помощью бета-счетчиков. К недостаткам метода относятся дорогостоящая аппаратура, необходимость оборудования для этих целей специальных помещений.

Рис. 21. Этапы лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции

Более доступен метод непрямой иммунофлюоресценции с использованием специальных клеточных линий, инфицированных ВИЧ. Чаще всего используют клеточные линии MOLT, H9, CEM и др. Клетки фиксируют на предметных стеклах с помощью ацетон-метанола, убивающего вирус, но сохраняющего его поверхностные антигены. С последними взаимодействуют антитела сыворотки инфицированного.

Интерпретация серодиагностики ВИЧ-инфекции представляет иногда определенные трудности. Так, при применении твердофазного ИФА (ELISA) необходимо ставить реакцию параллельно набором тестов (ELISA Biatest Mixte, ELISA Abott Mixte, ELISA Behring Mixte), ибо встречаются ситуации, когда два теста ELISA могут быть отрицательными, а третий в последующем положительным при повторном обследовании, что подтверждает диагноз ВИЧ-инфекции. Аналогичная ситуация наблюдается при использовании теста Western-Blot.

Большие трудности интерпретации результатов при перекресных реакциях и в случаях начальных стадий сероконверсии. В первой ситуации при повторном исследовании через определенный промежуток времени антитела не выявляются, а во втором в иммуноблоте появляются новые полосы, свидетельствующие о появлении антител к протеинам или гликопротеидам ВИЧ, характеризуя динамику ответной иммунной реакции на антигены вируса.

В США применяется несколько тестов, позволяющих с достаточной степенью достоверности выявлять ВИЧ-инфицированных:

ELISA - тест (твердофазный иммуноферментный анализ) выявления первого уровня, характеризуется большой чувствительностью, хотя и меньшей специфичностью перед нижеследующими,

Western-blot (иммунный блотинг) - весьма специфичный и наиболее используемый тест, позволяющий дифференцировать ВИЧ-1 и ВИЧ- 2,

Антигенемия р25 - тест, эффективный в начальных стадиях заражения.

Внедрение метода полимеразной цепной реакции существенно обогатили лабораторную диагностику вирусных инфекций, в том числе и ВИЧ-инфекции. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) является циклическим процессом увеличения в геометрической прогрессии копии ограниченного синтетическими олигонуклеотидами (праймерами) определенного специфического фрагмента ДНК, протекающей под воздействием термостабильной ДНК-полимеразы при строго заданных температурных и временных характеристиках (White T.J. et al.,1989). Чувствительность ПЦР зависит от специфичности, с которой олигонуклеотиды синтезируют необходимый участок ДНК по отношению к другим неспецифическим участкам нуклеиновой кислоты. Использование различных вариантов ДНК - ДНК-гибридизации с олигонуклеотидными зондами, имеющих ту или иную метку (радиоактивную, флюоресцентную и т.д.) значительно увеличивает чувствительность и специфичность определения продуктов амплификации. Метод гибридизации нуклеиновых кислот весьма высокоспецифичен, однако без проведения амплификации не всегда чувствителен, ибо в крови не велико количество инфицированных клеток. Сочетание двух методов позволило проводить анализ с минимальным количеством материала. В ПЦР может быть использована ДНК, выделенная из свежеполученного материала (кровь, ткани), а также из замороженного, высушенного или фиксированного.

Основным клинико-лабораторным показателем диагностики СПИДа среди ВИЧ-инфицированных в повседневной жизни стало определение содержания CD4+ лимфоцитов: уменьшение уровня ниже 200 клеток/мм является основным критерием постановки диагноза СПИД. Считается, что все ВИЧ-инфицированные лица с количеством CD4+лимфоцитов 200 клеток/ мм и ниже нуждаются как в противовирусной терапии, так и профилактике пневмоцистной пневмонии. И хотя у 1/3 ВИЧ-инфицированных с количеством СD4+ лимфоцитов менее 200 клеток/мм отсутствуют клинические проявления, опыт показал, что у них симптомы развиваются в ближайшие 2 месяца, поэтому они все расцениваются как больные в стадии СПИДа.

В специализированных лечебных учреждениях, в странах с высоким экономическим потенциалом обычно используют комбинацию нескольких лабораторных тестов.

J.W. Mellors, A. Munoz, J.V. Giorgi et al. (1997) в 4 университетских клинических центрах США с 1984 по 1985 г. наблюдали 4954 мужчины-гомосексуалиста 18 лет без клинических признаков СПИДа. Затем среди них отобрали 1813 участников с исходной серопозитивной реакцией на ВИЧ и 169 участников с сероконверсией, выявленной в течение 18 мес с момента включения в исследование. Из них только у 1604 (81%) участников число клеток CD4+ и уровень РНК ВИЧ-1 определялись как в начале исследования, так и в ходе наблюдения. Медиана продолжительности наблюдения за участниками, у которых не развился СПИД, составила 9,6 года. В качестве прогностических тестов определяли число лимфоцитов CD4+, СD3+ и СD8+; уровень РНК ВИЧ-1, b2-микроглобулина и неоптерина в крови; среди клинических показателей - кандидозный стоматит или лихорадка в течение 2 или более нед. Критерием оценки являлось время до развития СПИДа и до наступления связанной с ним смерти.

За время наблюдения у 998 больных развился СПИД, 855 больных умерли от него. Прогнозировать прогрессирование ВИЧ-инфекции можно было по уровням РНК ВИЧ-1, неоптерина, b2-микроглобулина и числу клеток CD4+. Относительный риск развития СПИДа и смерти от него прямо коррелировал с уровнем РНК ВИЧ-1. Оценка ожидаемого клинического исхода была более точной, когда с показателем вирусной нагрузки на плазму учитывали число клеток CD4+,. Прогностическая ценность показателей не не зависела от применения антиретровирусных препаратов.

Авторы пришли к выводу, что уровень РНК ВИЧ-1 лучше всего позволяет прогнозировать клинический исход при ВИЧ-инфекции, число клеток CD4+ в этом смысле менее информативно. Однако прогноз наиболее точен при совместном использовании двух этих показателей. Так, при уровне РНК ВИЧ-1 Ј500 копий/мл прогрессирование ВИЧ-инфекции до СПИДа через 9 лет наблюдалось у 3,6% больных, если число клеток CD4+ было >650/мм3, и у 22,1%, если число клеток CD4+ было менее 750/мм3. Точно так же, если уровень РНК ВИЧ-1 превышал 30 000 копий/мл, частота прогрессирования ВИЧ-инфекции через 9 лет при исходном числе клеток CD4+ >500, 351-500, 201-350 и менее 200/мм3, была равна соответственно 76,3%, 94,4%, 92,9% и 100%. Хотя 60% участников в последующем принимали антиретровирусные препараты, исходные показатели концентрации ВИЧ сохраняли свою прогностическую ценность независимо от дальнейшего лечения.

Полученные результаты подчеркивают важность интерпретации результатов определения концентрации ВИЧ с учетом как клинического состояния, так и числа клеток CD4+. Этот показатель не только помогает принять решение о времени начала антиретровирусной терапии, в других исследованиях была продемонстрирована его роль в оценке эффективности различных схем антиретровирусной терапии и в определении момента изменения лечебной тактики перед развитием клинической недостаточности . Но при использовании этого показателя следует проявлять осторожность, поскольку различные наборы реактивов для количественного определения уровня РНК ВИЧ могут давать различные результаты; кроме того, концентрацию вируса не следует определять во время или вскоре после успешного лечения ВИЧ-инфекции.

Диагностика ВИЧ инфекции необходима для назначения эффективного лечения. Чтобы диагностировать СПИД, проводится стандартная процедура обследования пациента. Она состоит из 2 этапов:

  • сдача скрининга;
  • иммунный блоттинг.

Для постановки диагноза дополнительно назначают ПЦР, экспресс-тестирование.

Проведение ИФА

Начальная диагностика СПИДа основана на применении лабораторных белков ВИЧ, которые улавливают специфические антитела. После их контакта с ферментами тест-системы изменяется цвет индикатора. Затем измененная цветовая гамма обрабатывается с помощью специальной аппаратуры, которая определяет результат тестирования.

Подобная лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции показывает результат через 21 день после инфицирования. С помощью ИФА нельзя определить наличие вируса. Данный метод диагностики способствует выявлению выработки антител к вирусу. Подобный процесс может наблюдаться через 2-6 недель после заражения.

Специалисты различают 4 поколения ИФА-систем с разной чувствительностью. Медики чаще применяют тесты 3 и 4 поколения. Эти системы созданы на основе рекомбинантных белков либо пептидов синтетического происхождения, которые обладают значительной точностью и специфичностью. ИФА применяется для выявления, мониторинга распространения вируса, что обеспечивает безопасность при проверке донорской крови. Точность таких систем колеблется в пределах 93-99%. Большей чувствительностью обладают тесты, выпущенные в Западной Европе. Чтобы выполнить диагностику, лаборант производит забор венозной крови (5 мл). За 8 часов перед исследованием рекомендуется отказаться от принятия пищи. Исследование чаще проводится утром.

Расшифровка данных

Для получения результатов теста потребуется 10 дней. Если результат отрицательный, то пациент не инфицирован. В таком случае лечение не назначается. Ложноотрицательный результат выявляется:

  • до 3 недель после инфицирования;
  • на последней стадии СПИДа при низкой иммунной системе;
  • при неправильной подготовке крови.

Если результат положительный, тогда пациент инфицирован. В таком случае проводят ИБ. Ложноположительный результат указывает на наличие сопутствующих заболеваний и неправильно проведенную подготовку крови. Если тестирование показано беременным, то в собранном материале врач может выявить неспецифические антитела, выработка которых не связана с вирусом. Собранный материал исследуется в референсе либо арбитражной лаборатории. Если результат повторного тестирования отрицательный, тогда первый результат – ошибочный. В таком случае ИБ не проводится.

Проведение иммунного блоттинга

Лечение СПИДа назначается при получении положительного результата иммунного блоттинга. Этот метод диагностики проводится с помощью нитроцеллюлозной полоски, на которую наносятся вирусные белки. Для ИБ используют венозную кровь, которая затем подвергается обработке. Белки, находящиеся в сыворотке, разделяются на группы с учетом их заряда и молекулярной массы. Для проведения такого процесса используется специальная аппаратура.

При наличии в исследуемом материале антител к вирусу, на полоске проявляются соответствующие линии. Положительное ИБ указывает на ВИЧ-инфицирование пациента. Сомнительный результат выявляется на начальных этапах заражения, при туберкулезе и онкологии, у беременных. В таких случаях рекомендуется повторное проведение ИБ.

Неопределенный результат ИБ указывает на наличие в иммуноблоте одного и более белков к вирусу. Подобная картина наблюдается при недавнем заражении, когда в крови находится незначительное количество антител к инфекции. В таком случае ИБ будет положительным через некоторое время. Неопределенный результат данного исследования может быть связан с отсутствием ВИЧ-инфекции при гепатитах, хронических обменных заболеваниях, в период беременности. В таком случае ИБ станет отрицательным или специалисты выявят у пациента причину неопределенного результата.

ПЦР исследование

Защитная система поражается на фоне внедрения вируса в человеческий организм. Для инкубационного периода характерен срок в 3 месяца. Поэтому после полового контакта с ВИЧ-инфицированным партнером рекомендуется пройти ПЦР-диагностику. Она позволит определить РНК вируса. Период, в течение которого рекомендуется пройти подобное исследование, составляет 8-24 месяца.

Для окончательного диагноза показана регулярная сдача крови на ВИЧ (1 раз в 3 месяца). За счет высокой чувствительности данное обследование позволяет выявить вирус через 10 дней после инфицирования. Ложноположительный результат при ПЦР можно получить и при наличии в организме пациента другой инфекции. ПЦР исследование считается дорогостоящей процедурой, так как требует наличия специального оборудования.

ПЦР назначается для выявления вируса у следующих лиц:

  • новорожденный, родившийся от ВИЧ-инфицированного матери;
  • пациенты с сомнительным ИБ.

Также данная методика показана для контроля концентрации вируса в крови и исследования донорской крови.

Быстрые методики исследования

К современным методам диагностики СПИДа специалисты относят экспресс-тесты. Для их расшифровки потребуется 10-15 мин. Иммунохроматографические тесты, основанные на капиллярном потоке, обеспечивают точные результаты. Такие системы тестирования представлены в виде специальных полосок, на которые наносится кровь либо слюна. При наличии вируса через 10 мин на тесте появляются 2 полоски:

  • контрольная;
  • цветная.

В данном случае результат тестирования носит положительный характер. На отрицательный результат указывает появление одной контрольной полоски. Для подтверждения полученного результата проводится ИБ. На основе общий данных врач ставит диагноз, назначает лечение.

Можно выявить вирус в домашних условиях. Для этого используют специальные экспресс-наборы. OraSure Technologies1 – система, разработанная в США. Если после тестирования выявлен положительный результат, пациенту рекомендуется пройти полное обследование в медицинском центре.

Обследование ребенка

Новорожденные детки, которые родились от инфицированных матерей, срочно подвергаются обследованию. С помощью серологических методик нельзя точно выявить вирус у деток в возрасте 5-18 месяцев. Но результат такого обследования важен при проведении ИБ.

Выявить инфицирование у деток можно с помощью ПЦР. ДНК вируса выявляет специалист у детей первого месяца жизни. Чтобы установить концентрацию РНК возбудителя, специалисты определяют провирус иммунодефицита. Для исследования врач использует цельную кровь либо ее высохшее пятно. Материал помещается в пробирку с консервантом ЭДТА (пропорция 1:20). Образец необходимо хранить при температуре не выше 8°С (на протяжении 2 суток). Не допускается замораживание материала.

Для получения образца сухой крови наносят цельную жидкость на специальную бумагу. Образец можно хранить при температуре ниже 8°С. Карточки используют в течение 8 месяцев. Новорожденного ребенка необходимо осмотреть, взяв материал на исследование, в течение следующих сроков:

  • через 48 часов после рождения;
  • в возрасте 2 месяцев после рождения;
  • через 3-6 месяцев после рождения.

Если врач выявил ген провируса ВИЧ через несколько часов после появления младенца на свет, то произошло внутриутробное инфицирование малыша. Заразиться вирусом можно и во время родов либо при грудном вскармливании. Результаты, которые указывают на наличие ДНК вируса в 2 образцах, указывают на развитие СПИДа у ребенка. Диспансерное наблюдение не требуется, если результаты ПЦР отрицательные через 4 месяца после рождения малыша.

Если результат тестирования отрицательный, но симптоматика СПИДа присутствует, тогда рекомендуется проконсультироваться с врачом. Подобная клиника может быть спровоцирована другими заболеваниями. Единственным и 100%-ным методом диагностики вируса считается тестирование. Даже квалифицированные и опытные специалисты не могут определить вирус по проявляемой симптоматике.

Если через некоторое время результаты пациента отрицательные, то ВИЧ в организме отсутствует.

При этом не учитывается симптоматика. Но подобная клиническая картина может быть связана со СПИДофобией. В таком случае требуется помощь психолога. При необходимости ребенку или взрослому назначают соответствующее лечение.